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测总氮时出现的问题
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我在用紫外分光光度法测水中的总氮时，空白吸光度值总是为负值，且样品吸光度与空白吸光度之差也为负值，请问可能的原因是什么？ [ Last edited by yxy8451 on 2007-4-10 at 15:57 ] |
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lee121199491
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4楼2006-11-19 22:29:55
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bird007(金币+1):3q
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由于目前实验室使用的分光光度计大多是双光束的，因此 ，通常在做单个固定波长吸光度测定时，是在某个选定的波长下 ，先将两个比色皿都装纯水后点“Zero”调零 ，这样做可以抵消两个 比色皿的差异。但在总氮的测定方法中．是对两个波长下吸光度的同时测定 ，这样 ，当我们用“Zero”调零时，实际上只是对单个波长(275 nm)调零 ，而没有同时在 220 nm下调零，因此若此时仪器本身的基线发生漂移 ，就会使 220 nm下的吸光度漂移 ，从而给实验带来系统误差。我们将两个 比色皿装上纯水后点击“Zero”调零 ．然后 直接点击 “Measure”测量 ，结果证实了我们 的猜测 ：A220=o．213，A275=o．003(理论上A220也应在 0．000左右 )。 当分光光度计光源使用了一定时间后 ，光强会 出现一定的衰减 ，而此时若仍然使用一段时间以前 的基线作基准，样品池的吸收值就会相对增高，带来 正误差。我们将两个比色皿装上纯水后，在操作界面 上选择 200～300 nm进行基线扫描，并将它作为当 前的用户基线，就可抵消吸光度的偏离了。通过这种 方法校正后 ，进行了一个空白实验，吸光度为：A220= 0．022，A 275=0．000，A b=0．022。结果令人满意。由此可 见，定期对分光光度计的基线进行更新 ，可有效地校 正实验误差。 [ Last edited by 孔边倒角 on 2006-11-20 at 14:52 ] |
5楼2006-11-20 14:50:27
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lee121199491
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