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zm254

金虫 (小有名气)

[交流] 测总氮时出现的问题

我在用紫外分光光度法测水中的总氮时,空白吸光度值总是为负值,且样品吸光度与空白吸光度之差也为负值,请问可能的原因是什么?

[ Last edited by yxy8451 on 2007-4-10 at 15:57 ]
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孔边倒角

金虫 (小有名气)


bird007(金币+1):3q
由于目前实验室使用的分光光度计大多是双光束的,因此 ,通常在做单个固定波长吸光度测定时,是在某个选定的波长下 ,先将两个比色皿都装纯水后点“Zero”调零 ,这样做可以抵消两个 比色皿的差异。但在总氮的测定方法中.是对两个波长下吸光度的同时测定 ,这样 ,当我们用“Zero”调零时,实际上只是对单个波长(275 nm)调零 ,而没有同时在 220 nm下调零,因此若此时仪器本身的基线发生漂移 ,就会使 220 nm下的吸光度漂移 ,从而给实验带来系统误差。我们将两个 比色皿装上纯水后点击“Zero”调零 .然后 直接点击 “Measure”测量 ,结果证实了我们 的猜测 :A220=o.213,A275=o.003(理论上A220也应在 0.000左右 )。
当分光光度计光源使用了一定时间后 ,光强会 出现一定的衰减 ,而此时若仍然使用一段时间以前 的基线作基准,样品池的吸收值就会相对增高,带来 正误差。我们将两个比色皿装上纯水后,在操作界面 上选择 200~300 nm进行基线扫描,并将它作为当 前的用户基线,就可抵消吸光度的偏离了。通过这种
方法校正后 ,进行了一个空白实验,吸光度为:A220= 0.022,A  275=0.000,A b=0.022。结果令人满意。由此可 见,定期对分光光度计的基线进行更新 ,可有效地校 正实验误差。

[ Last edited by 孔边倒角 on 2006-11-20 at 14:52 ]
5楼2006-11-20 14:50:27
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orientalgrass

银虫 (小有名气)


bird007(金币+1):3q
参比和样品的位置对换了?
2楼2006-11-19 13:42:05
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zm254

金虫 (小有名气)

没有

没有呀 以去离子水为参比
3楼2006-11-19 22:09:48
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lee121199491

银虫 (小有名气)

我做总氮的时候也遇到一些问题,仪器读数很不稳定,而且本来含量应该相差很多的样品最后没有得到很好的结果,不知道怎么回事!
4楼2006-11-19 22:29:55
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