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dongniaoxin

铁杆木虫 (正式写手)


[交流] AKTA系统中的紫外波长为什么设定280、260、220三个值呢

如题
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416114799

至尊木虫 (知名作家)


★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
silicare(金币+5, BioEPI+1): 谢谢参与 2011-08-23 11:15:45
dongniaoxin(金币+5): 内容详实啊,长见识了,谢谢 2011-08-24 16:52:16
一个 是对应DNA,一个是对应RNA,一个是对应蛋白质,根据各自的值,可以算出杂质成分及含量。
具体来说是:
  核酸的最大吸收波长为260nm,蛋白质为280nm,在波长260nm时,1OD值相当于双链DNA浓度为50μg/ml,单链寡核苷酸的含量为30μg/ml,可以据此来计算核酸样品的浓度,还可通过测定在260nm和280nm的OD值的比值(OD260/OD280),估计核酸的纯度。
  纯净DNA的比值为1.8,RNA为2.0。若比值高于1.8说明DNA样品中的RNA尚未除尽,若样品中含有酚和蛋白质将导致比值降低。270nm存在高吸收表明有酚的干扰。
  核酸所含嘌呤和嘧啶分子具有共轭双键,在260nm波长处有最大吸收峰。
蛋白在280nm波长处有最大吸收峰
  OD230来评估样品中是否存在一些污染物,如碳水化合物,多肽,苯酚等,较纯净的核酸 OD260 /OD 230 的比值大于 2.0。

[ Last edited by 416114799 on 2011-8-23 at 10:35 ]
2楼2011-08-23 10:32:45
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葡萄王子

铁虫 (初入文坛)


可以根据你的样品做修改的,不知道你的系统是什么型号
3楼2014-10-13 10:45:35
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