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dongniaoxin

铁杆木虫 (正式写手)

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[交流] AKTA系统中的紫外波长为什么设定280、260、220三个值呢

如题

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1楼 2011-08-23 09:55:12

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416114799

至尊木虫 (知名作家)

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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
silicare(金币+5, BioEPI+1): 谢谢参与 2011-08-23 11:15:45
dongniaoxin(金币+5): 内容详实啊，长见识了，谢谢 2011-08-24 16:52:16

一个是对应DNA，一个是对应RNA，一个是对应蛋白质，根据各自的值，可以算出杂质成分及含量。
具体来说是：
  核酸的最大吸收波长为260nm，蛋白质为280nm，在波长260nm时，1OD值相当于双链DNA浓度为50μg/ml，单链寡核苷酸的含量为30μg/ml，可以据此来计算核酸样品的浓度,还可通过测定在260nm和280nm的OD值的比值（OD260/OD280），估计核酸的纯度。
  纯净DNA的比值为1.8，RNA为2.0。若比值高于1.8说明DNA样品中的RNA尚未除尽，若样品中含有酚和蛋白质将导致比值降低。270nm存在高吸收表明有酚的干扰。
  核酸所含嘌呤和嘧啶分子具有共轭双键，在260nm波长处有最大吸收峰。
蛋白在280nm波长处有最大吸收峰
  OD230来评估样品中是否存在一些污染物，如碳水化合物，多肽，苯酚等，较纯净的核酸 OD260 /OD 230 的比值大于 2.0。

[ Last edited by 416114799 on 2011-8-23 at 10:35 ]