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beiju

铜虫 (初入文坛)


[交流] 蛋白层析

蛋白层析前需要用相应的缓冲液透析吗?
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jackie_jang

金虫 (正式写手)



beiju(金币+1):谢谢参与
是的,可以除盐,还有就是能和层析时,缓冲液系统一样。
3楼2011-08-21 15:22:56
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beiju

铜虫 (初入文坛)


用tris-HCl洗脱杂蛋白时为什么会连续出现两个峰   亲和层析
2楼2011-08-21 14:50:43
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zhu-hongwen

至尊木虫 (知名作家)



beiju(金币+1):谢谢参与
??
4楼2011-08-21 16:38:09
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beiju(金币+1):谢谢参与
层析有多种,各自要求的样品条件不一样,有的对样品体积还有要求,所以不可一概而论,总结起来就是

离子交换层析柱:蛋白质样品要求低盐(绝对要透析除盐!)利于吸附,用离子强度来梯度解吸附,依照吸附力不同而分离(也有用pH梯度,分离原理同),不注重要求样品体积,只注重蛋白质吸附量。附阴、阳离子层析柱说明书见附件。

疏水层析:蛋白质样品要求高盐吸附(绝对不可以透析除盐!),低盐洗脱解吸附,不要求样品体积,只注重蛋白质吸附量。说明书见附件。

分子排阻:对蛋白质样品的盐浓度毫无要求!但是不可以透析,因为希望样品的体积越小越好,一般最好不超过层析柱体积的1%。说明书见附件。

亲和层析:依照各种原理而成,但是层析柱条件不同,是否要求盐浓度还要看层析柱。
5楼2011-08-21 21:02:33
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