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蛋白层析
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| 蛋白层析前需要用相应的缓冲液透析吗？ |
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2楼2011-08-21 14:50:43
3楼2011-08-21 15:22:56
4楼2011-08-21 16:38:09
冼亮淀粉酶
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★
beiju(金币+1):谢谢参与
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层析有多种，各自要求的样品条件不一样，有的对样品体积还有要求，所以不可一概而论，总结起来就是 离子交换层析柱：蛋白质样品要求低盐（绝对要透析除盐！）利于吸附，用离子强度来梯度解吸附，依照吸附力不同而分离（也有用pH梯度，分离原理同），不注重要求样品体积，只注重蛋白质吸附量。附阴、阳离子层析柱说明书见附件。 疏水层析：蛋白质样品要求高盐吸附（绝对不可以透析除盐！），低盐洗脱解吸附，不要求样品体积，只注重蛋白质吸附量。说明书见附件。 分子排阻：对蛋白质样品的盐浓度毫无要求！但是不可以透析，因为希望样品的体积越小越好，一般最好不超过层析柱体积的1%。说明书见附件。 亲和层析：依照各种原理而成，但是层析柱条件不同，是否要求盐浓度还要看层析柱。 |
5楼2011-08-21 21:02:33
冼亮淀粉酶
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★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
amisking(金币+7, BioEPI+1): good！ 2011-08-21 21:09:56
beiju(金币+5): 谢谢 应该会有帮助 2011-08-22 16:10:25
amisking(金币+7, BioEPI+1): good！ 2011-08-21 21:09:56
beiju(金币+5): 谢谢 应该会有帮助 2011-08-22 16:10:25
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层析有多种，各自要求的样品条件不一样，有的对样品体积还有要求，所以不可一概而论，总结起来就是 离子交换层析柱：蛋白质样品要求低盐（绝对要透析除盐！）利于吸附，用离子强度来梯度解吸附，依照吸附力不同而分离（也有用pH梯度，分离原理同），不注重要求样品体积，只注重蛋白质吸附量。附阴、阳离子层析柱说明书见附件。强阳HiPrep 16 10 SP XL 强阴HiPrep 16 10 Q XL 疏水层析：蛋白质样品要求高盐吸附（绝对不可以透析除盐！），低盐洗脱解吸附，不要求样品体积，只注重蛋白质吸附量。说明书见附件。HiPrep 16 10 Phenyl FF (high sub). 分子排阻：对蛋白质样品的盐浓度毫无要求！但是不可以透析，因为希望样品的体积越小越好，一般最好不超过层析柱体积的1%。说明书见附件。GE SuperdexTM 75 所有附上的说明书都只是该类中的一种而已，起个代表性，普及知识。亲和层析：依照各种原理而成，但是层析柱条件不同，是否要求盐浓度还要看层析柱，讨论不了。 |
6楼2011-08-21 21:08:05
leimiao_hit
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10楼2011-08-23 09:27:44
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zhen_fang12楼
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beiju(金币+1):谢谢参与
