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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求高手指点RNA电泳图~~~~
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wanghd2826

铁虫 (小有名气)

[求助] 求高手指点RNA电泳图~~~~

第一次提RNA，用的是RNA iso plus，提取完后用普通1.2%的琼脂糖凝胶电泳跑的，电泳仪等用前均用DEPC水处理过，感觉过程中比较小心，但是结果还是不尽如人意，没有看到明显的18s 和28s，我是继续提纯呢，还是重提RNA呢，请各位提点意见~~谢谢
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1楼 2011-08-20 09:00:42
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wulishu

新虫 (初入文坛)
交流一下我的经验：
我提的是动物皮肤组织总RNA，由于以前看过一篇牛人写RNA提取的，学习到了一些
1.手套可以不戴，但要保证手不接触到容器内壁，但是口罩一定要戴，实验服要穿
2.我没有用液氮研磨，个人觉得易污染，把组织放进EP管加入trizol直接用小研磨杵研磨，最好匀浆一下（很重要）
3.洗涤的乙醇不用冷冻，不影响
4.我自己使用中发现invitrogen的很好用
5.针对你所提取的组织中蛋白或其他杂质含量不同可以再进一步改动，比如酚氯仿抽提等

现在就想到这么多，没提到的也都是按照说明书操作就可以
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21楼2011-09-01 09:18:14
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wqj1988926

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
西瓜(金币+1): 同意 2011-08-20 22:32:10
重提吧，降解的很厉害呢。
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风雪夜归人
2楼2011-08-20 09:07:11
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wanghd2826

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by wqj1988926 at 2011-08-20 09:07:11:
重提吧，降解的很厉害呢。

同感啊 我觉的得重提了，RNA酶简直防不胜防啊。。。郁闷
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3楼2011-08-20 09:19:10
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monkey491816

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
1949stone(金币+2): 鼓励 2011-08-20 20:03:44
应该是你的RNA提取的不好，我之前提取RNA是电泳仪都没有什么处理跑出来的结果肯定是3条带的，胶你用0.8%-1%就可以啦。RNA降解很严重，且有蛋白污染。重新提取一次吧
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4楼2011-08-20 15:49:36
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