24小时热门版块排行榜    

查看: 6192  |  回复: 41
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

永不后悔2838

铁虫 (小有名气)

[交流] 为什么提取的DNA总是降解? 已有27人参与

各位大侠,为什么我提取的DNA总是降解呢?用的是传统的苯酚-氯仿抽提的方法,最后一步加入冰乙醇沉淀的时候能看到大量的絮状沉淀,TE溶解过夜,琼脂糖胶检测时条带却是这样(如图)。分光光度计检测浓度和纯度都正常。实验室几个人提取都是这样,不知道是什么原因,所用的试剂已经重新配过,还是这个结果。请问有没有遇到过类似情况的,这是什么原因,怎么解决呢?请大家指点帮助~


回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

时间是贼,偷走一切……
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

silicare

荣誉版主 (文坛精英)

合伙创业版兼职版主

优秀版主

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
adslye(金币+2): 交流~交流~但提RNA的酚,DNA也应该是单一条带额。 2011-08-19 11:25:48
引用回帖:
6楼: Originally posted by adslye at 2011-08-18 19:14:12:
gDNA降解无非两个原因:
1.细胞内DNA酶作用于gDNA,你的材料在放入提取液前没有在细胞破碎的情况下放久吧?
2.机械力作用:有很剧烈的长时间涡旋吗?或者之类的。但一般也不会有事。

另外,至于PH,水饱和酚 ...

DNA是不会跑到有机相的,只是在中间层,而且那也只是理论上,trizol提出的RNA都会有基因组,更何况楼主一个新手

而且DNA降解后电泳图是smear,也不是这样的一坨

他的图明显是提的RNA
13楼2011-08-19 08:52:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 42 个回答

silicare

荣誉版主 (文坛精英)

合伙创业版兼职版主

优秀版主


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
注意你酚氯仿的PH值
2楼2011-08-18 14:27:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

永不后悔2838

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
1楼: Originally posted by 永不后悔2838 at 2011-08-18 14:25:07:
各位大侠,为什么我提取的DNA总是降解呢?用的是传统的苯酚-氯仿抽提的方法,最后一步加入冰乙醇沉淀的时候能看到大量的絮状沉淀,TE溶解过夜,琼脂糖胶检测时条带却是这样(如图)。分光光度计检测浓度和纯度都正 ...

非常感谢,那个都是从公司买的,而且也换过不同的,结果还一样,请问还有别的可能吗?
时间是贼,偷走一切……
3楼2011-08-18 17:38:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

永不后悔2838

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by silicare at 2011-08-18 14:27:01:
注意你酚氯仿的PH值

非常感谢,那个都是从公司买的,而且也换过不同的,结果还一样,请问还有别的可能吗?
时间是贼,偷走一切……
4楼2011-08-18 17:39:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 广西大学材料导师推荐 +3 夏夏夏小正 2026-03-17 5/250 2026-03-21 22:20 by 金昊ML
[考研] 材料求调剂 +5 @taotao 2026-03-21 5/250 2026-03-21 20:55 by lbsjt
[考研] 298求调剂 +4 上岸6666@ 2026-03-20 4/200 2026-03-21 17:14 by 学员8dgXkO
[考研] 0805材料320求调剂 +3 深海物语 2026-03-20 3/150 2026-03-21 15:46 by 无际的草原
[考研] 南昌大学材料专硕311分求调剂 +6 77chaselx 2026-03-20 6/300 2026-03-21 07:24 by JourneyLucky
[考研] 08工科 320总分 求调剂 +6 梨花珞晚风 2026-03-17 6/300 2026-03-21 03:40 by JourneyLucky
[考研] 材料工程(专)一志愿985 初试335求调剂 +3 hiloiy 2026-03-17 4/200 2026-03-21 03:04 by JourneyLucky
[考研] 化学求调剂 +4 临泽境llllll 2026-03-17 5/250 2026-03-21 02:23 by JourneyLucky
[考研] 265求调剂 +9 梁梁校校 2026-03-17 9/450 2026-03-21 02:17 by JourneyLucky
[考研] 一志愿武理材料305分求调剂 +6 想上岸的鲤鱼 2026-03-18 7/350 2026-03-21 01:03 by JourneyLucky
[考研] 304求调剂 +7 司空. 2026-03-18 7/350 2026-03-20 23:08 by JourneyLucky
[考研] 求调剂,一志愿:南京航空航天大学大学 ,080500材料科学与工程学硕,总分289分 +4 @taotao 2026-03-19 4/200 2026-03-20 22:14 by JourneyLucky
[考研] 一志愿苏州大学材料求调剂,总分315(英一) +5 sbdksD 2026-03-19 5/250 2026-03-20 22:10 by luoyongfeng
[考研] 350求调剂 +5 weudhdk 2026-03-19 5/250 2026-03-20 22:04 by luoyongfeng
[考研] 环境工程调剂 +9 大可digkids 2026-03-16 9/450 2026-03-20 17:38 by 醉在风里
[考研] 08工学调剂 +5 用户573181 2026-03-20 5/250 2026-03-20 15:47 by xia_2003
[考研] 085410人工智能专硕317求调剂(0854都可以) +4 xbxudjdn 2026-03-18 4/200 2026-03-20 09:07 by 不168
[考研] 求调剂 +3 暗涌afhb 2026-03-16 3/150 2026-03-20 00:28 by 河南大学校友
[考研] 材料与化工求调剂 +7 为学666 2026-03-16 7/350 2026-03-19 14:48 by 尽舜尧1
[考研] 327求调剂 +6 拾光任染 2026-03-15 11/550 2026-03-15 22:47 by 拾光任染
信息提示
请填处理意见