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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 安瓿瓶冻干菌种活化
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飞翔的诗人

银虫 (小有名气)

[求助] 安瓿瓶冻干菌种活化

本人购买了一种粪产碱菌的安瓿瓶冻干菌种，以前没活化过安瓿瓶菌种，想请教一下该怎么活化，而一般传几代后才算活化了？另外，活化后再怎么保存菌种比较好，是直接保存4℃斜面或平板，还是再保存甘油管（甘油管又怎么保存比较好？）？
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1楼 2011-08-16 23:09:55
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

cyt198

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

飞翔的诗人(金币+10): 2011-08-17 16:37:21
操作步骤：1）安管的开封：a用浸过70%酒精的脱脂棉擦净安管；b用火焰将安管顶端加热；c滴无菌水至加热的安管顶端使玻璃开裂；d用锉刀或镊子敲下已开裂的安管顶端。2）菌株恢复培养：a用无菌吸管吸取0.3-0.4ml适宜的液体培养基，滴入安管内轻轻振荡，使冻干菌体溶解成悬浮状。b取约0.2ml菌体悬液移植于指定的琼脂斜面或平板培养基，剩余的菌液注入指定的液体培养基内（3-4ml），在建议温度下培养。
    活化的代数根据菌株而定，有传2-3次，有的要5-6次才能用于工业生产，总之，看菌株的状态吧
   试管斜面保存只能短期，一个月左右，相对来说，甘油保存法效果好些，且简单易行，保存方法：取菌液与15%甘油等体积混匀，于-20度保存。
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2楼2011-08-17 15:37:06
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飞翔的诗人

银虫 (小有名气)
感谢各位的答复，今天刚活化了一管冻干菌，吸了0.2ml菌液到平板培养基，剩余菌液都加到摇瓶（装了50m液体培养基l）里了，平板用涂布棒涂了一下，结果没涂干，里面还可以看到一点菌液，所以就先正放着培养了，没有倒置培养。安瓿瓶好难烧啊，也许是第一次弄所以太小心了，先烧再滴水，重复了好多次，最后总算弄开了，加入液体培养基后感觉振荡得太强烈了点，应该是轻轻振荡。希望最后都能长出来，而且不要染啊，
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4楼2011-08-18 13:24:10
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普通回帖

wppzz

金虫 (小有名气)
我说点菌种保藏，培养好的菌液与灭菌甘油以7：3左右的比例混匀，分装，-20℃保存
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3楼2011-08-17 22:35:25
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张小宇

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
26217楼: Originally posted by cyt198 at 2011-08-17 15:37:06
操作步骤：1）安管的开封：a用浸过70%酒精的脱脂棉擦净安管；b用火焰将安管顶端加热；c滴无菌水至加热的安管顶端使玻璃开裂；d用锉刀或镊子敲下已开裂的安管顶端。2）菌株恢复培养：a用无菌吸管吸取0.3-0.4ml适宜的 ...

你好，请问剩余的菌液注入指定的液体培养基内，建议温度下培养后，再想用的话应该怎么操作呢
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5楼2012-09-11 16:49:44
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294190940

银虫 (初入文坛)
学习了
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6楼2013-05-24 15:22:10
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酷酷的峰哥

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 飞翔的诗人 at 2011-08-18 13:24:10
感谢各位的答复，今天刚活化了一管冻干菌，吸了0.2ml菌液到平板培养基，剩余菌液都加到摇瓶（装了50m液体培养基l）里了，平板用涂布棒涂了一下，结果没涂干，里面还可以看到一点菌液，所以就先正放着培养了，没有倒 ...

您好，您活化了多长时间长起来的呢？
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7楼2016-03-13 21:10:22
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飞翔的诗人

银虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 酷酷的峰哥 at 2016-03-13 21:10:22
您好，您活化了多长时间长起来的呢？...

冻干菌种活化后24小时左右长出来了吧，
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8楼2016-03-14 16:11:29
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酷酷的峰哥

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 飞翔的诗人 at 2016-03-14 16:11:29
冻干菌种活化后24小时左右长出来了吧，...

啊，昨天做的12个小时还一点反应都没有给我急得啊，现在24小时开始变浑浊了，吓死我了，以为让我整死了

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9楼2016-03-14 16:14:04
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飞翔的诗人

银虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 酷酷的峰哥 at 2016-03-14 16:14:04
啊，昨天做的12个小时还一点反应都没有给我急得啊，现在24小时开始变浑浊了，吓死我了，以为让我整死了
...

冻干菌种刚开始是长得慢点， 后面活化好了就长得快了
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10楼2016-03-14 16:29:24
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