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飞翔的诗人

银虫 (小有名气)

[求助] 安瓿瓶冻干菌种活化

本人购买了一种粪产碱菌的安瓿瓶冻干菌种,以前没活化过安瓿瓶菌种,想请教一下该怎么活化,而一般传几代后才算活化了?另外,活化后再怎么保存菌种比较好,是直接保存4℃斜面或平板,还是再保存甘油管(甘油管又怎么保存比较好?)?
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张小宇

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
26217楼: Originally posted by cyt198 at 2011-08-17 15:37:06
操作步骤:1)安管的开封:a用浸过70%酒精的脱脂棉擦净安管;b用火焰将安管顶端加热;c滴无菌水至加热的安管顶端使玻璃开裂;d用锉刀或镊子敲下已开裂的安管顶端。2)菌株恢复培养:a用无菌吸管吸取0.3-0.4ml适宜的 ...

你好,请问剩余的菌液注入指定的液体培养基内,建议温度下培养后,再想用的话应该怎么操作呢
5楼2012-09-11 16:49:44
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cyt198

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

飞翔的诗人(金币+10): 2011-08-17 16:37:21
操作步骤:1)安管的开封:a用浸过70%酒精的脱脂棉擦净安管;b用火焰将安管顶端加热;c滴无菌水至加热的安管顶端使玻璃开裂;d用锉刀或镊子敲下已开裂的安管顶端。2)菌株恢复培养:a用无菌吸管吸取0.3-0.4ml适宜的液体培养基,滴入安管内轻轻振荡,使冻干菌体溶解成悬浮状。b取约0.2ml菌体悬液移植于指定的琼脂斜面或平板培养基,剩余的菌液注入指定的液体培养基内(3-4ml),在建议温度下培养。
    活化的代数根据菌株而定,有传2-3次,有的要5-6次才能用于工业生产,总之,看菌株的状态吧
   试管斜面保存只能短期,一个月左右,相对来说,甘油保存法效果好些,且简单易行,保存方法:取菌液与15%甘油等体积混匀,于-20度保存。
2楼2011-08-17 15:37:06
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wppzz

金虫 (小有名气)

我说点菌种保藏,培养好的菌液与灭菌甘油以7:3左右的比例混匀,分装,-20℃保存
3楼2011-08-17 22:35:25
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飞翔的诗人

银虫 (小有名气)

感谢各位的答复,今天刚活化了一管冻干菌,吸了0.2ml菌液到平板培养基,剩余菌液都加到摇瓶(装了50m液体培养基l)里了,平板用涂布棒涂了一下,结果没涂干,里面还可以看到一点菌液,所以就先正放着培养了,没有倒置培养。安瓿瓶好难烧啊,也许是第一次弄所以太小心了,先烧再滴水,重复了好多次,最后总算弄开了,加入液体培养基后感觉振荡得太强烈了点,应该是轻轻振荡。希望最后都能长出来,而且不要染啊,
4楼2011-08-18 13:24:10
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