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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 新药研发 » 质量控制 » 小分子多肽的分离纯化
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海王之心2751

金虫 (小有名气)

[求助] 小分子多肽的分离纯化

前几天老板给我一个大海捞针的问题啊，我没做过不知道从哪里入手，具体是;把一个具有溶血栓的大分子多肽用酶切法分解成小分子多肽，找出有溶血栓活性小分子多肽，并分离纯化，做成注射剂。现在把大分子多的氨基酸系列排列好了，并找了几种没的切割为点，主要是不知道那段小分子有活性啊 ？有没有哪位高人做这方面的，指点指点小弟，谢谢！
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1楼 2011-08-16 16:43:25
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brighten

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
zhychen2008(金币+1): 感谢回帖交流 2011-08-22 22:25:17
海王之心2751(金币+5): 小分子容易吸收，特别是化妆品，如果分子量小于500，那很理想的！ 2011-10-01 08:29:35
可能比较麻烦噢，首先要确定你大分子内有哪几个酶切位点or你所用酶的酶切位点，将大分子酶切后进行分离纯化，分别得到各段小分子，然后测活性确定活性片段。问题是如果你的大分子多肽有活性的话，为何要切为小分子呢？
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3楼2011-08-22 15:43:07
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zhaocy8903

木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

★
zhychen2008(金币+1): 多谢回帖交流 2011-08-22 22:24:59
海王之心2751(金币+2): 谢谢你！ 2011-10-01 08:24:30
可以考虑分段表达蛋白，然后测活，再逐步减少片段大小
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2楼2011-08-16 21:51:08
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rongming

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

海王之心2751(金币+1): 酶切后会暴露出更多的底物结合位点 2011-10-21 15:58:01
即使大分子多肽具有溶血活性，但你酶解以后很可能根本找不到具有活性的小分子多肽。楼主如果大分子多肽有足够的量，还能分离纯化，可以把酶解以后的每个小肽用HPLC分离以后在检测溶血活性。另外大分子多肽是否有空间结构，酶解要先破坏空间结构
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4楼2011-08-23 08:44:02
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daisy212475

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
lk590(金币+1): 谢谢 2011-11-28 12:46:03
海王之心2751(金币+2): 2012-01-12 23:17:21
引用回帖:
1楼: Originally posted by 海王之心2751 at 2011-08-16 16:43:25:
前几天老板给我一个大海捞针的问题啊，我没做过不知道从哪里入手，具体是;把一个具有溶血栓的大分子多肽用酶切法分解成小分子多肽，找出有溶血栓活性小分子多肽，并分离纯化，做成注射剂。现在把大分子多的氨基酸 ...

一般反相色谱分离纯化，效果相对比较理想。
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6楼2011-11-28 08:26:06
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