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carl_mei
铁虫
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虫号: 1228272
注册: 2011-03-10
性别: GG
专业: 生物化学
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
个人觉得普通电泳跑出很多杂带,首先考虑是不是PCR体系(buffer和酶)和条件(退火温度)的问题,如果优化后没有改善,可以考虑重新设计引物(注意引物的特异性)。
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一下
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永远不走捷径!永远不对可能坏的事情好奇!永远不在仇恨和痛苦中做决定!
21楼
2013-03-15 13:40:31
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kidluag
金虫
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注册: 2012-02-22
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专业: 蔬菜学与瓜果学
★ ★ ★
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2013-05-25 21:41:31
加入APS和TEMED后不要急于灌胶,要先充分摇匀,灌入板中就不易再混匀了,因胶成分不均匀导致不同点样孔条带位置出现偏差。做试验不能按照步骤赶,而要稳重有信心。从条带清晰程度大部分样品看还算不错,说明PCR体系程序可以,一些没出的条带可能是因为PCR环节你的操作失误导致某药品未加入或者总DNA本身含量不达标。另外如果灌胶时出现气泡等问题应在点样时将影响的点样孔错开,避免影响结果
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一下
(1人)
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被迫的无知小小博
22楼
2013-05-25 01:03:23
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