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小木虫的home

新虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
我以前也做这个
问题从来就没断过
楼主 多跑跑就知道了
你用得什么 marker ?不像 pbr121
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11楼2011-09-27 15:21:24
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niuzheng

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
为什么会跑出杂带呢？？？它和主带有什么关系？？？求解答，谢谢
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要一步一步的向前走啊。
12楼2011-10-23 16:32:33
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wxq999

新虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
西瓜:编辑内容 2011-10-24 17:27
西瓜(金币-10): 2011-10-24 17:27:30
-------------广告内容--------------------

[ Last edited by 西瓜 on 2011-10-24 at 17:27 ]
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13楼2011-10-24 17:05:41
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l20065091

新虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
我也在做SSR也出现这样的情况，楼主你用的电泳仪什么型号的？？
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14楼2011-11-07 14:42:17
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dingxiuying

木虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
西瓜(金币+3): 鼓励交流 2011-11-07 18:49:58
wanhscn: 可重新发帖发问，问题解决率会提高！ 2011-11-07 21:50:27
我也在做SSR，一个前辈给我的建议是：在最初的一步寻找多态性引物对的时候，可以用3%琼脂糖胶跑PCR产物，待筛选出多态性引物对后，再考虑用聚丙烯酰胺胶跑。我就是这么做的。
我以前也跑过聚丙烯酰胺胶，感觉很麻烦。一天下来也完不成几块板，不知现在一块板整个跑下来，一直到显色完成大概需要多长时间？
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我喜欢默默地被你注视默默地注视着你，我喜欢深深地被你爱着深深地爱着你
15楼2011-11-07 16:52:49
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yanyuan

银虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
首先，你的胶做的很不好，封底和灌胶都不行；每个样的浓度都不一致，不知道是你点样前没混匀还是PCR体系有问题...
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16楼2011-12-20 15:54:36
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kidluag

金虫 (正式写手)

不自信的师生
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
小丹木木(金币+2): 鼓励积极交流哦 2012-02-22 08:20:04
PCR扩增后出现的条带与预计的大小不一致，或大或小，或者同时出现特异性扩增带 与非特异性扩增带。非特异性条带的出现，其原因：一是引物与靶序列不完全互补、或引物聚合形成二聚体。二是Mg2+离子浓度过高、退火温度过低，及PCR循环次数过多有关。其次，是酶的质和量，往往一些来源的酶易出现非特异条带而另一来源的酶则不出现，酶的量过多有时也会出现非特异性扩增。其对策）有：①必要时，重新设计引物。②减低酶的量或调换另一来源的酶。③降低引物量，适当增加模板量，减少循环次数。④适当提高退火温度或采用二温度点法(93℃变性，65℃左右退火与延伸，也叫两步法)。
PCR扩增有时出现涂抹带或片状带或地毯样带。其原因往往由于酶的量过大或酶的质量差，dNTP浓度过高，Mg2+浓度过高，退火温度过低，循环次数过多引起。其对策有：①减少酶的量，或调换另一来源的酶。②减少dNTP的浓度。③适当降低Mg2+浓 度。④增加模板量，减少循环次数
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被迫的无知小小博
17楼2012-02-22 04:30:37
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希罗雅

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
出现杂带会不会和酶有关系，试试用Taq酶
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凡事学习
18楼2012-07-20 09:48:51
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hxswdl

至尊木虫 (文坛精英)

Tortoise

文献杰出贡献
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
不知你的问题解决没？我最近做SSR跑page，条带还不错，就是回收后做二次pcr准备跑琼脂糖胶回收测序的，结果，二次PCR与一次条带一样，急啊
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Dripping Concentrated!!energetic and active！
19楼2013-01-24 12:56:03
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farkll

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引物特异性不好，建议提高退火温度试试
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20楼2013-03-14 16:14:08
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