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huojinlong8610金虫 (小有名气)
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[求助]
翻译 分子生物学
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分别提取猪18种组织的RNA，反转录为cDNA，利用RT-PCR方法扩增肿瘤坏死因子（TNF-α）基因编码区序列，将纯化的片段与pMD18-T载体连接，转化大肠杆菌DH 5α，筛选阳性克隆并测定其序列，利用生物信息学方法分析其序列特征，并与其他物种构建系统进化树。同时采用半定量RT-PCR方法分析TNF-α基因在猪18种组织中的表达情况。结果显示，猪TNF-α基因编码区全长699 bp（GenBank登录号：JF831365），其编码232个氨基酸。氨基酸序列同源性分析表明，与猫等12个物种具有80%以上的相似性，分子系统进化研究表明与牛、山羊、绵羊及海豚的关系较近。多组织半定量RT-PCR研究表明TNF-α mRNA在猪的多个组织中均有表达，其中在中脑、卵巢、脾、肺、神经及胃中表达量较高。 非诚勿扰啊！！！ |
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