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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 培养基加双抗的方法
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暖木warm

金虫 (正式写手)

[求助] 培养基加双抗的方法

新买的培养基没有加双抗，请问加双抗的具体步骤是？每500Ml的RPMI1640培养基需要加多少青霉素和链霉素呢
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1楼 2011-08-12 14:07:31
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gloryping

铁杆木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

暖木warm(金币+2): 2011-08-12 22:14:42
应该是各100单位/毫升，但我没具体配过，希望其他人解答一下。
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2楼2011-08-12 14:45:43
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子曰包子好吃

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

暖木warm(金币+2): 双抗是自己配的，双抗的100单位分别相当于多少克呢？ 2011-08-13 08:47:15
你的双抗是自己配的 还是买的？如果是买的话，一般为1%的双抗，就是500ml里加5ml双抗。自己配的话，配成10000单位的，也是加5ml
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3楼2011-08-13 08:06:11
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xbl3688

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

这个培养基没用过，但我想加抗生素的方法是相通的。以AMP抗性的LB培养基为例，配置液体（或固体）培养基，分装成各种所需体积，灭菌。使用前无菌条件下加入抗生素，我们使用的Amp、Ery、Spc抗生素都是每100ml培养基加100ul，终浓度为100ug/ml.
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生活的乐趣在于善于发现美，学会欣赏美
4楼2011-08-13 17:03:37
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xbl3688

银虫 (正式写手)
sorry，貌似这个培养基是用来培养细胞的，我上面的回答外行了
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生活的乐趣在于善于发现美，学会欣赏美
5楼2011-08-13 17:08:31
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qingyuansw20

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

暖木warm(金币+1): 2011-08-14 19:31:43
经典配置方法：自己想的，绝对经典。1、取高压好的100ml PBS。2、取80万单位和100万单位的青霉素和链霉素。3、无菌注射器用PBS溶解100万单位链霉素，将小瓶中溶解充分的链霉素吸入到100mlPBS里。4、倒去20ml。5、同样方法使80万单位的链霉素放入100mlPBS里。6、EP管分装。1ml为单位。
使用：99ml培养基中加1ml以上液体。即为100单位。
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6楼2011-08-13 17:10:52
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qingyuansw20

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

5、同样方法使80万单位的链霉素放入剩余80mlPBS里
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7楼2011-08-13 17:12:32
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qingyuansw20

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

5、同样方法使80万单位的链霉素放入剩余80ml含青霉素PBS里
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8楼2011-08-13 17:13:19
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