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韩俊

金虫 (正式写手)

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[求助] SDS-PAGE电泳求助

跑了几次电泳，跑出来的胶，总是靠近上样一段没有条带，下面又有显示了，而且Mark也只有5条（应该有六条），最高分子量（97.4）的条带不见了。有人跟我说是灌注分离胶后，液封的时候，吧上层的分离胶稀释了，所以高分子量就没有分开，造成上层一块没有条带。

可是液封时候我已经非常小心了，希望各位帮帮忙，分析分析原因，小弟不甚感激。

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1楼2011-08-11 22:50:51

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至尊木虫 (知名作家)

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【答案】应助回帖

引用回帖:

10楼: Originally posted by 韩俊 at 2011-08-14 13:38:45:
求教两个问题
1.那怎么样防止这个不均匀呢？
2.经常倒分离胶的时候会在小烧杯里剩下一点，但是往往板里的已经凝结了，不过小烧杯里的还是不凝结，这是为什么？

如果你的胶凝得很快，说明你的催化剂还是没有失效的，也有可能你加了太多，加了太多也会导致胶太硬，跑时往往容易烧胶，板里的分部比较均匀，凝得快是自然的（比较平，散得比较开）。这个与你的胶不均匀无关。
很多实验室的DNA胶都是回收利用的，用久了自然杂质也多，不知道你们是是否这样，如果不是的话，你可以摇匀点，加的时候快点，也尽量让胶出于一个水平面，高低不同的话，浓度自然不同，就不均匀了。
我觉得你花几天去摸索一下吧，把认为比较可能的原因做个实验。磨刀不误砍柴工啊