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纯渴

金虫 (正式写手)

[求助] 滑膜细胞的原代提取

我刚接触细胞,要做大鼠膝关节的滑模细胞,看了几篇文献,想问下做过的大侠,消化时间一般多少的,今天做了,用二型胶原酶加DMED共4ML消化了2.5H,然后在用胰蛋白酶加EDTA消化了半小时,最后发现没有细胞,请问是取出的组织比较少(一只大鼠)还是消化时间过度,细胞都裂解了
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zmeng

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
adslye(金币+3): 感谢交流~鼓励新虫~祝顺利! 2011-08-12 10:24:49
纯渴(金币+5): 谢谢, 2011-08-12 10:34:53
silicare(BioEPI+1): 2011-08-12 16:07:38
我在养人滑膜的   估计养的方法一样  我是先用1立方左右的组织干贴在培养瓶底  3小时后加入20%血清的培养基(切记不能让组织块动了)培养  两天左右就可以看到有细胞爬出来了   。还有一种  就是剪组织匀浆 不用消化  让进去养  一样能养出来
2楼2011-08-12 10:17:21
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WXHGM123

新虫 (初入文坛)

老师您好,请问下您后面是怎么处理的,我现在也要做大鼠原代滑膜细胞,遇到和您类似的问题,我用两只老鼠四只脚,最后也没发现细胞,希望得到您的帮助,不盛感激
3楼2016-03-31 18:01:14
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