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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药理学 » 如何增加β-淀粉样蛋白的毒性，向做出来的人求助！
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cddryw

铁虫 (正式写手)

[求助] 如何增加β-淀粉样蛋白的毒性，向做出来的人求助！

建立AD模型，为了增加Aβ对PC12细胞的致死率，按照论文方法老化Aβ，即用DMSO溶解，再用蒸馏无菌水补足为保存液37度下自然老化7天。
但是之后使Aβ作用细胞24h或则48h，细胞的存活率都高达80%以上。
怎么办呢？使用的片段是25-35，日本peptide institute公司提供的，用量20-50um都试过。除了换公司产品换片段之外，还有没有别的方法?
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梅花精神
1楼 2011-08-11 08:51:37
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pxmyz

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
cddryw(金币+3): 2011-08-11 10:40:07
qinhy(金币+1): O(∩_∩)O谢谢回帖~ 2011-08-11 20:19:28
目前我也在做AD模型，不过我用的是冈田酸诱导SK-N-SH。我看的文献是淀粉样蛋白直接加入灭菌的生理盐水，37度孵育7天，使其称为凝集状态的AB25-35,4度贮存备用，用时稀释。
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Ican，Ido.
2楼2011-08-11 10:02:56
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cddryw

铁虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by pxmyz at 2011-08-11 10:02:56:
目前我也在做AD模型，不过我用的是冈田酸诱导SK-N-SH。我看的文献是淀粉样蛋白直接加入灭菌的生理盐水，37度孵育7天，使其称为凝集状态的AB25-35,4度贮存备用，用时稀释。

这个方法用了，残念，效果没有。我现在正在和这边的人用丁香园一个师兄的办法，先用DMSO溶解，然后添加无菌蒸馏水，再添加培养液，37度老化7-14天。
我始终怀疑这个和A-beta生产公司以及批次还有细胞是否异变有关系...........我们这边sigma公司生产的A-beta异常贵，价格是日产的5倍，而且有一两个日本人用日产这个公司做出来了，有论文发表，老化的方法都差不多。所以教授觉得是我能力问题.........很郁闷。
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梅花精神
3楼2011-08-11 10:33:24
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