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清新夏青新虫 (小有名气)
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[求助]
有高人做蛋白结晶吗
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我现在做的蛋白已经长出了晶体，但晶体没有衍射点，该怎么进行优化啊 请高手指教一下啊 |
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 蛋白结晶及结构解析 | 【分子生物】EPI帖 |
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jinkui960
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2楼2011-08-10 16:45:36
BioChemCom
银虫 (小有名气)
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【答案】应助回帖
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感谢参与，应助指数 +1
西瓜(金币+5, MolEPI+1): Good! 2011-12-14 16:05:56
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西瓜(金币+5, MolEPI+1): Good! 2011-12-14 16:05:56
| 这是比较常见的现象。第一：你的没有衍射是在什么光源下做的？2. 衍射时，用的保护剂是什么？这点要请教有经验的人，多尝试几种不同的条件；3. 那就是继续优化。优化的方向分为几个方面：1. 优化晶体的生长条件，包括pH，盐离子浓度、PEG，additives。如果你的晶体不止在一种条件下生长的，可以同时尝试这些不同的条件。2. 优化你的纯化方法，进一步鉴定你纯化蛋白的均一性、温度条件下的稳定性等等。3. 重新做截断的构建、切掉多余的Tag，或者尝试不同物种的类似物等等。 |
3楼2011-12-14 08:54:33
