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嫘诺

新虫 (小有名气)

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[求助] 关于用农杆菌侵染法获得转基因植物的几点问题

虫友们，先遇到些难题，希望有懂得的给指点指点。现在这谢谢大家了。
现在我正在做转基因水稻，水稻品种为日本晴，实验过程中遇到了几点问题
1植株的分化率很低，具体没统计，不过一个皿里30-40块愈伤也就有3个出芽的。有的皿里一个也不出。
2分化的比较的慢，大约1个月才会有芽点出现，芽点出来后吧，长成小苗的时间也比较久。
3关于农杆菌侵染时的最佳OD值，是0.5呢还是0.8.OD值应该反映的菌的生长时期吧，那侵染时是不是采用的对数期的菌，那时OD值是多少呢？
4关于继代有文献称继代4次最好，有的则说可以去掉继代，各位又做转基因水稻的都继代几次啊？

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1楼 2011-08-06 18:23:36

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419249049

木虫 (正式写手)

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★ ★
SongQ5285(金币+2): 有些道理 2012-01-05 17:28:05

引用回帖:

1楼: Originally posted by 嫘诺 at 2011-08-06 18:23:36:
虫友们，先遇到些难题，希望有懂得的给指点指点。现在这谢谢大家了。
现在我正在做转基因水稻，水稻品种为日本晴，实验过程中遇到了几点问题
1植株的分化率很低，具体没统计，不过一个皿里30-40块愈伤也就有3个 ...

所以你不能指望大家给你一个确定的答案，因为做转基因的外植体材料基本上都不一样，即使同样是水稻品种种源也存在差异，所以无法确定OD值是0.5还是0.6抑或是0.8，还有关于继代培养几次的问题这个你要去做实验解决这个问题，上面也说了，不同的材料都不一样。别人的实验结果应该只能是你的参考，而不能作为你的答案。如果你有答案了，那要你还做什么啊？所以楼主还是要做实验的，祝你成功！