24小时热门版块排行榜

返回列表

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

空蓝Y劫

新虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 12.5
散金: 9
帖子: 57
在线: 22.8小时
虫号: 1346434
注册: 2011-07-15
专业: 食品科学基础

[求助] SDS-PAGE 凝胶电泳的Marker使用

SDS-PAGE 凝胶电泳的Marker使用前要煮沸吗？如果煮了会对电泳有什么影响？

本人新手，刚接触凝胶电泳，听说Marker，是蛋白，严禁煮沸。不小心煮了下。结果也没见什么不好啊！

还有接着做westen blot 实验的时候老师说该出标记的Marker 位置没出标记。是不是我煮了marker的原因？

但其他出标记的样有的因为是菌体的原因，上样前也有煮沸过啊，为什么它们出标记了煮的Marker不出标记呢？？

回复此楼

» 猜你喜欢

1楼 2011-07-22 12:55:32

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

大俏俏

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 1
帖子: 1
在线: 5.8小时
虫号: 3615320
注册: 2014-12-27

我想问一下Marker怎么上样，目的是什么？麻烦说一下操作过程。

赞一下

回复此楼

13楼2014-12-28 12:25:58

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

查看全部 13 个回答

空蓝Y劫

新虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 12.5
散金: 9
帖子: 57
在线: 22.8小时
虫号: 1346434
注册: 2011-07-15
专业: 食品科学基础

我想问的是：

1.SDS-PAGE电泳时Marker煮沸与否对电泳结果有无影响，若有，有何种影响。

2.westen blot实验中硝酸纤维素膜上是否出现电泳条带与蛋白是否变性有无关系。

赞一下

回复此楼

2楼2011-07-22 13:16:37

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

雪山飞狐7233

铁杆木虫 (著名写手)

铁杆小虫

BioEPI: 9
应助: 10 (幼儿园)
金币: 18825.6
散金: 209
红花: 44
帖子: 1530
在线: 199.1小时
虫号: 593313
注册: 2008-09-05
性别: GG
专业: 化学计量学与化学信息学

【答案】应助回帖

★ ★
空蓝Y劫(金币+1): 2011-07-22 17:32:11
amisking(金币+2): 鼓励应助 2011-07-22 19:11:01
空蓝Y劫(金币+4): 谢谢了 2011-08-02 14:14:25

引用回帖:

Originally posted by 空蓝Y劫 at 2011-07-22 12:55:32:
SDS-PAGE 凝胶电泳的Marker使用前要煮沸吗？如果煮了会对电泳有什么影响？

本人新手，刚接触凝胶电泳，听说Marker，是蛋白，严禁煮沸。不小心煮了下。结果也没见什么不好啊！

还有接着做westen blot 实验的 ...

蛋白电泳分变性电泳和非变性电泳，SDS-PAGE 本身就是电泳，所以电泳样品和marker要经过变性处理（通常就是100度，10min）。但是现在有预染的marker，已经处理完毕了，而且在电泳的时候能过在胶上看到相应的分子量条带。然而普通的marker就需要经过变性处理了。

赞一下(1人)

回复此楼

梦在路就在！