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mdl308

金虫 (著名写手)

[求助] 请教一个更换流动相的问题?本人菜鸟~~谢啦

我们长期使用的是有机相(甲醇:水)做流动相处理样品。现在要讲流动相更换为磷酸缓冲液~~之间我应该如何过渡?用什么流动相过渡?

看到有些说的是异丙醇,但是具体比例和流速?详情又是什么呢?

岛津LC-20A     C18柱    150*46mm
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石呓

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

从保护柱子的角度下,还是需要过渡一下的。
比如你柱子的保存溶剂是甲醇:水80:20,磷酸盐缓冲液:甲醇40:60,那么可以从80%甲醇慢慢降低浓度至40%甲醇水溶液,这个用双通道调整比例比较方便,按5%的比例降低,流速按你平常用的流速就好,一般0.8或者1.0差不多了,每个浓度大约10分钟(具体视实际情况定哈,这个我经常的操作方法),然后再换上磷酸盐流动相,基线平衡好就可以进样了
路漫漫其修远兮,吾将上下而求索。
10楼2011-07-20 22:02:33
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石呓

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by mdl308 at 2011-07-20 22:09:07:
大侠~~做完实验,我打算用纯水清洗泵头 和手动进样器~~这样是可以的吧?

不是大侠哈,小虾一个,呵呵。
可以用纯水洗手动进样器,然后也用稍高的甲醇水冲洗哈
泵头嘛,可以用低浓度的甲醇/乙腈溶液清洗撒,冲洗最后还是用高浓度的有机溶剂置换出低浓度的溶液,避免长菌。
个人建议哈,不一定是标准的哟
路漫漫其修远兮,吾将上下而求索。
13楼2011-07-20 22:25:23
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