| 查看: 749 | 回复: 2 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[交流]
关于基因工程药物在CHO细胞中的表达问题
|
|||
|
战友们，大家好！小弟想做基因工程药物在CHO细胞中的大规模表达培养。有以下几个问题： 1.关于外源基因转入CHO细胞：我想问问载体的选择对于后面的表达量影响大么，不同的载体会造成表达量的巨大差异么？？（如果哪位战友做过这方面的工作并获得较大产量，那么你们用什么载体呢？）还有就是转染策略：是选择贴壁细胞转染、筛选成功之后再驯化成悬浮培养还是直接用CHO的悬浮细胞转染呢？另外，采用哪种方法转染效率高并且利用筛选到转入目标质粒的阳性细胞株呢？ 2.有什么方法可以克服悬浮之后的细胞成团问题，也就是说能够实现细胞的高密度、不结团的大量表达么？？ 3.有木有自制的无血清培养基？自制培养基需要考虑哪些加入物质？ |
回复此楼» 猜你喜欢
面上5B能上会吗？
已经有4人回复
-
329求调剂，一志愿西北工业大学，材料工程（085601）
已经有9人回复
-
322求调剂：一志愿湖南大学 材料与化工（085600），已过六级。
已经有4人回复
-
085600 材料与化工 329分求调剂
已经有14人回复
-
材料科学与工程求调剂
已经有3人回复
-
289求调剂
已经有5人回复
-
化学工程085602 305分求调剂
已经有21人回复
-
26申博自荐
已经有5人回复
-
296求调剂
已经有5人回复
-
总分293求调剂
已经有10人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 中科院过程工程研究所招聘（2012）基因药物剂型工程
已经有29人回复
- 基因工程课程小结
已经有20人回复
- 求助：关于基因表达调控机制的问题
已经有9人回复
- 关于基因表达量下调的问题
已经有3人回复
- 【课件】基因工程药物\蛋白质、酶的分离纯化及实例
已经有99人回复
- 基因工程菌 诱导表达
已经有8人回复
- 【求助/交流】植物基因工程的诱导型启动子，问题多多！
已经有10人回复
- 【求助/交流】CHO细胞结团问题
已经有9人回复
- 【求助/交流】载体的病毒启动子（动物细胞中表达目的基因）探讨
已经有10人回复
- 【求助/交流】基因工程菌诱导蛋白表达的问题
已经有14人回复
- 求助 基因工程菌保藏问题
已经有11人回复
» 抢金币啦！回帖就可以得到:
-
【强推｜可留校】济南大学博士后招聘（水利工程/铁锰碳环境过程）
+1/285
-
【招聘】温州医科大学/附属医院/瓯江实验室李校堃院士团队诚聘博士后和科研人员
+1/192
-
湖北大学陈苗苗教授食品安全研究团队诚招博士生
+1/182
-
焊接专业应届毕业生招聘
+1/82
-
重庆交通大学院士团队招收材料、能源动力专业硕士研究生
+2/50
-
坐标广州，征女友
+2/48
-
天津城建大学招收物理、化学或者生物调剂生一名，前往天津大学联合培养
+1/38
-
首都师范大学招收材料与化工专硕调剂生--中科院半导体所共培
+1/38
-
福建农林大学材料院招收调剂硕士生
+1/37
-
澳大利亚昆士兰大学化工学院招收全奖博士生2名
+1/26
-
北京理工大学-化学与化工学院-招收2026级博士生 [申请-考核制]
+1/26
-
齐齐哈尔大学化学与化学工程学院招收专硕调剂
+1/10
-
苏州初创公司诚聘化学过程工艺与硬件系统工程师
+1/8
-
同济大学环境学院 肖倩特聘研究员课题组 招聘硕士/博士（长期有效）
+1/8
-
三峡大学环境功能材料课题组招生化学、材料、化工硕士调剂生
+1/8
-
长江师范学院化学化工学院2026年硕士研究生接收调剂的通知
+1/8
-
欢迎调剂报考
+1/6
-
调剂来这
+1/4
-
岭南大学（香港）诚招Research Talent Hub人才（创新及科技基金研究人才库）
+1/3
-
上海师范大学有机化学专业研究生招生
+1/1
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
wahaha9115(金币+1): 2012-02-21 17:27:21
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
wahaha9115(金币+1): 2012-02-21 17:27:21
|
稳定表达对基因载体的要求不高，关键是看你基因插入的位点。市场上有定点整合的质粒载体，可以使你的基因整合到转录频率高的地方。 一般是先转染，然后筛选，驯化为无血清悬浮培养。 如果细胞悬浮培养时持久地结团，可在生长液中加入50μg/ml 的胰 蛋白酶；3,5个细胞成团没事！ 实现高产量表达，细胞株和细胞密度是两个关键因素。多筛几株备用，细胞密度主要的影响还是培养基等。 自制培养基可以，不过没有几年的功夫拿不下来。 把上面的问题都搞透了，没有三两年的功夫不好弄。加油！ |
3楼2011-10-28 14:51:44
2楼2011-10-28 09:44:43
