| 查看: 841 | 回复: 2 | |||
[交流]
关于基因工程药物在CHO细胞中的表达问题
|
|
战友们，大家好！小弟想做基因工程药物在CHO细胞中的大规模表达培养。有以下几个问题： 1.关于外源基因转入CHO细胞：我想问问载体的选择对于后面的表达量影响大么，不同的载体会造成表达量的巨大差异么？？（如果哪位战友做过这方面的工作并获得较大产量，那么你们用什么载体呢？）还有就是转染策略：是选择贴壁细胞转染、筛选成功之后再驯化成悬浮培养还是直接用CHO的悬浮细胞转染呢？另外，采用哪种方法转染效率高并且利用筛选到转入目标质粒的阳性细胞株呢？ 2.有什么方法可以克服悬浮之后的细胞成团问题，也就是说能够实现细胞的高密度、不结团的大量表达么？？ 3.有木有自制的无血清培养基？自制培养基需要考虑哪些加入物质？ |
回复此楼» 猜你喜欢
欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律
已经有123人回复
-
今天基金会出结果吗？20260819
已经有13人回复
-
时间戳变了，能看出什么问题？
已经有16人回复
-
filecode，4个jtjc了
已经有13人回复
-
为什么余额宝的年化利率越来越低？主要原因有哪些？
已经有5人回复
-
今天放榜没戏了吧
已经有5人回复
-
今天放榜吗？
已经有15人回复
-
filecode=后面第一个是大写字母
已经有12人回复
-
2027广东省杰青
已经有10人回复
-
朋友圈看到的
已经有8人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 中科院过程工程研究所招聘（2012）基因药物剂型工程
已经有29人回复
- 基因工程课程小结
已经有20人回复
- 求助：关于基因表达调控机制的问题
已经有9人回复
- 关于基因表达量下调的问题
已经有3人回复
- 【课件】基因工程药物\蛋白质、酶的分离纯化及实例
已经有99人回复
- 基因工程菌 诱导表达
已经有8人回复
- 【求助/交流】植物基因工程的诱导型启动子，问题多多！
已经有10人回复
- 【求助/交流】CHO细胞结团问题
已经有9人回复
- 【求助/交流】载体的病毒启动子（动物细胞中表达目的基因）探讨
已经有10人回复
- 【求助/交流】基因工程菌诱导蛋白表达的问题
已经有14人回复
- 求助 基因工程菌保藏问题
已经有11人回复
» 抢金币啦！回帖就可以得到:
-
每年这时候我都再仔细读一遍《范进中举》
+1/567
-
五大联赛看好哪支球队
+5/315
-
散金求好运
+1/267
-
2026年财务管理、经济与信息技术国际会议 (FMEIT 2026)
+1/201
-
一点琐碎的家务事，却非常困扰我，让我内耗
+2/102
-
上海交通大学张航课题组招聘博士后（电化学能量存储与转换）
+1/79
-
上海交通大学张航课题组招聘博士后（电化学储能）
+1/44
-
武汉，诚征男友，不异地，年龄大了
+1/33
-
5年了，散金祈愿面上得中，愿望成真再散十倍
+1/23
-
散尽家财，祈求中标。
+5/10
-
2027环境工程博士申请
+1/5
-
中国科学院生态环境研究中心环境工程相关方向招收保送硕士和联合培养博士和硕士研究生
+1/4
-
南京医科大学-冯璋课题组-招收2027级生化与分子生物学专业博士和硕士研究生
+1/3
-
偶然点开小木虫，发现十年已经过去了
+1/2
-
河海大学海洋环境污染与生态毒理学研究组招收2027级硕士生 及博士研究生
+1/2
-
北理工集成电路杰青团队 | 诚招科助理
+1/2
-
老虫友
+1/2
-
中国科学院生物物理研究所田勇课题组招聘联合培养生
+1/2
-
清华大学环境课题组招聘环境工作专业客座生研究生2-3名（应用导向）
+1/1
-
【产品测评分享】体外转录产量不理想、dsRNA 副产物高？T7 RNA 聚合酶实测体验
+1/1
2楼2011-10-28 09:44:43
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
wahaha9115(金币+1): 2012-02-21 17:27:21
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
wahaha9115(金币+1): 2012-02-21 17:27:21
|
稳定表达对基因载体的要求不高，关键是看你基因插入的位点。市场上有定点整合的质粒载体，可以使你的基因整合到转录频率高的地方。 一般是先转染，然后筛选，驯化为无血清悬浮培养。 如果细胞悬浮培养时持久地结团，可在生长液中加入50μg/ml 的胰 蛋白酶；3,5个细胞成团没事！ 实现高产量表达，细胞株和细胞密度是两个关键因素。多筛几株备用，细胞密度主要的影响还是培养基等。 自制培养基可以，不过没有几年的功夫拿不下来。 把上面的问题都搞透了，没有三两年的功夫不好弄。加油！ |
3楼2011-10-28 14:51:44
