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zengjijun

银虫 (正式写手)

[交流] 经常使用液相色谱的帮帮忙!

我的是water系列,现在的主要问题是试验的重复性偏差,比如同种样品配成不同浓度,做了两组,液相分析结果是:
1        134.74
2        129
3        114
4        112.7
5        123.06
~~~
1        111.9
2        111.66
3        113.34
4        109.06
5        115.53(浓度 mg/g)
目前发现,柱压偏高,大于2000psi,我每次分析的样都是9++,这个过程中,尽管每个样柱压变化范围在2%以内,但不同样的先后压力有一定变化,约在4%,不只有否关系? 此外,保留时间的重复性还是较好:
1        6.525
2        6.552
3        6.558
4        6.568
5        6.552
大家有什么好的建议解决这个问题。。。。

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asymmetry

荣誉版主 (知名作家)

皇家神龍教-asymmetry

优秀版主

★ ★
cad_0(金币+1):很全面,谢谢参与~
zengjijun(金币+1):
(1)不知道你做的1,2组是不是同种浓度?出现这么大的误差肯定是偶然误差,而不是系统误差。柱压的变化只会影响你的保留时间对浓度不会有影响,因为柱压高,你的东西出峰时间快,这时可能会出现有些杂质被包裹在你所需的物质的峰中,从而导致你的浓度偏高,实际上HPLC与过柱是一样的道理。
(2)看你的出峰时间毕竟还是有些差别。可能是这样的原因,你在注意一下你的谱图看看主峰两边有没有杂质峰,可能被包裹。
(3)在做HPLC时,柱压不能太高,这个要注意了,因为柱压高了,流动相的阻力就大,可能冲毁柱子中的固定相,柱子的寿命就会变短,并且一根柱子的价格也不匪啊!
(4)我现在也是在做Agilent的,Waters的泵特别好,但是比较难操作,不过我们学校现在已经买了台Waters,还要培训的,到时用了给你一个比较好的答复。现在我对Agilent比较了解。
(5)以上仅供参考!

[ Last edited by asymmetry on 2006-10-29 at 10:27 ]
2楼2006-10-29 10:19:37
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月亮弯弯

金虫 (著名写手)


cad_0(金币+1):谢谢参与~
你这可能是进样量不准,引起重复性差,也有可能是你配制的样品浓度不在分析线性范围之内,所以重复性差。
3楼2006-10-29 11:24:08
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zengjijun

银虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by asymmetry at 2006-10-29 10:19 AM:
(1)不知道你做的1,2组是不是同种浓度?出现这么大的误差肯定是偶然误差,而不是系统误差。柱压的变化只会影响你的保留时间对浓度不会有影响,因为柱压高,你的东西出峰时间快,这时可能会出现有些杂质被包裹在 ...

这两组是同一样品培的不同浓度后反算的结果,偶然误差??这也太大了,这些数据完全无法满足我的分析,柱压高可能是杂质的原因,以前只有1500左右,柱子是:YMC-packODS-A,现在还在逐步分析原因。。。。
4楼2006-10-29 12:55:33
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karen2004karen

银虫 (小有名气)


yan4793(金币+1):谢谢参与应助,欢迎常来问题求助版!!: ) 请继续帮助分析!
1.你的同一浓度样品溶液是同一份溶液吗?如果不是同一份,那有可能是配制溶液产生的误差.
2.进样量不准也有可能造成一定误差.有时即使是满环进样,譬如100ul和80ul也会不一样,建议每次进样量要一致.
3.不知道你的流动相是否含盐.如果有盐,而又没有冲洗干净,时间长了柱压也会高.
5楼2006-10-29 21:11:23
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zengjijun

银虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by karen2004karen at 2006-10-29 09:11 PM:
1.你的同一浓度样品溶液是同一份溶液吗?如果不是同一份,那有可能是配制溶液产生的误差.
2.进样量不准也有可能造成一定误差.有时即使是满环进样,譬如100ul和80ul也会不一样,建议每次进样量要一致.
3.不知道你的流 ...

溶液都是分析纯的乙醇,也许不同瓶的有所差别,但应该不是很大巴,进样我们是自动进样(20ul),主要是想了解一下大家也想的重复性好不好,现在的数据我完全无法分析处理!。。
6楼2006-10-30 09:04:23
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tang13520

金虫 (小有名气)

的是water系列,现在的主要问题是试验的重复性偏差,比如同种样品配成不同浓度,做了两组,液相分析结果是:
1        134.74
2        129
3        114
4        112.7
5        123.06
你在做一次这组数据, 看是不是还是你做的结果,仪器在第一针也有时不准
7楼2007-02-08 00:22:22
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