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xiongba

铁虫 (小有名气)

[交流] 关于液相的一个奇怪问题,请各位高手指教~~~~ 已有18人参与

各位大神,小弟近期在做高效液相的时候碰到一个奇怪的问题:我在摸索流动相条件时,分别进100ng/ml、200ng/ml、500ng/ml的标准溶液各五针,可结果每针样品出峰的位置偏差都很大,有的17min就出来了,有的在22分钟才出!请问为什么同一个样品同一种物质出峰时间差异会这么打?!
     
       并且200ng/ml的第一针的峰面积和100ng/ml的最后一针的峰面积大致相等,500ng/ml的第一针的峰面积与200ng/ml的最后一针的峰面积大致相等。这又是怎么一个情况啊?!请各位大神们给小弟说说原因~……
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hch0608

金虫 (著名写手)

★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
样品在流动相里稳定不?
2楼2011-07-14 11:33:09
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wangyangliut

银虫 (正式写手)

等结果。。。
3楼2011-07-14 13:56:50
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bjwangxun

金虫 (小有名气)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
novus(金币+1): 谢谢交流,欢迎常来药学版! 2011-07-14 20:33:23
1、首先考虑设备问题。主要是流路是否通畅、色谱柱是否干净等。
2、所选择的流动相是否适宜?
3、如是单泵运行要考虑流动相的变化,如环境温度的影响等。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

4楼2011-07-14 14:09:48
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xiongba

铁虫 (小有名气)

送鲜花一朵
引用回帖:
Originally posted by bjwangxun at 2011-07-14 14:09:48:
1、首先考虑设备问题。主要是流路是否通畅、色谱柱是否干净等。
2、所选择的流动相是否适宜?
3、如是单泵运行要考虑流动相的变化,如环境温度的影响等。

以前我用这个条件没有这种情况啊~后来换了几种流动相,现在又换回来了,结果就不好了,我今天用流动相平衡了一上午,现在还是不行,第一针出峰时间是11分钟,第二针竟然是22分钟很无语啊……但是峰面积的平行性倒还不错……请大神再给我分析分析~~~~不胜感激啊~~~~
5楼2011-07-14 14:35:42
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xiongba

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by hch0608 at 2011-07-14 11:33:09:
样品在流动相里稳定不?

恩,稳定性还行啊~~~
6楼2011-07-14 14:36:45
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ltxin2009

铁杆木虫 (职业作家)

★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
看看压力是不是稳定;注意温度的变化,最好用柱温箱。
7楼2011-07-14 14:55:17
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xiongba

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by ltxin2009 at 2011-07-14 14:55:17:
看看压力是不是稳定;注意温度的变化,最好用柱温箱。

柱压一直很稳定,别且我用着柱温箱呢啊~~~
8楼2011-07-14 14:56:53
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thanking1669

木虫 (职业作家)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
novus(金币+1): 谢谢交流,欢迎常来药学版! 2011-07-14 20:33:58
物质是否纯净,

流动相中是否稳定

每针走长一点,看是不是上次残留

换根柱子看看是不是柱子问题
9楼2011-07-14 15:14:22
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xiaoxiao270

至尊木虫 (著名写手)

★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
你柱子冲干净了没有
分离、分离
10楼2011-07-14 15:16:45
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