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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 大家高效液相使用完后都是怎么冲柱子的？
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elescaller

铁杆木虫 (知名作家)

铁杆木虫 (无名作家)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
karl2100(金币+1): 谢谢回复！ 2011-07-15 00:32:51
汗死，居然用纯水……过不了一年，你的键合相就全溶了……

普通反相柱一般都是10%甲醇冲一个半小时，然后甲醇半小时。糖蛋白手性柱用的是15%异丙醇冲两小时。尚未用到过其他类型柱子。

10%甲醇和甲醇的过渡用10分钟左右即可。没有必要设很多梯度，不便于操作。

[ Last edited by elescaller on 2011-7-14 at 23:07 ]
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11楼2011-07-14 23:05:20
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momojixing

铜虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
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Originally posted by ririwowo at 2011-07-14 22:46:24:
先用5%的甲醇，然后梯度上升到95%的甲醇，流动相有缓冲盐也是这样的吗？请教了，还真的不太懂

我们都是10%的甲醇或者乙腈来保存柱子的  有机相太高有可能缓冲盐会析出吧？
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12楼2011-07-15 14:01:33
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momojixing

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by elescaller at 2011-07-14 23:05:20:
汗死，居然用纯水……过不了一年，你的键合相就全溶了……

普通反相柱一般都是10%甲醇冲一个半小时，然后甲醇半小时。糖蛋白手性柱用的是15%异丙醇冲两小时。尚未用到过其他类型柱子。

10%甲醇和甲醇的过渡 ...

离子色谱柱短期保存大都是流动相直接保存就行了
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13楼2011-07-15 14:02:19
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wolftree

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
一般柱子都是不耐纯水的，容易塌陷，就算买了可以用纯水的柱子，建议一般先用95%的水冲柱子，时间不等，如果是用过缓冲盐的最好多冲一下（以免后面换成含醇量大的流动相时缓冲盐析出来堵柱子），然后梯度换到95%的醇（梯度不必过多，可以用大梯度），最后柱子用95%的醇保存。

[ Last edited by wolftree on 2011-7-15 at 14:36 ]
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自己做个头像，O(∩_∩)O哈哈~
14楼2011-07-15 14:34:24
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elescaller

铁杆木虫 (知名作家)

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Originally posted by momojixing at 2011-07-15 14:02:19:
离子色谱柱短期保存大都是流动相直接保存就行了

缓冲盐没有冲干净是不可以直接保存的，即使你用水相保存也不能保证里面的盐不会影响柱子。
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15楼2011-07-15 14:50:26
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momojixing

铜虫 (小有名气)
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Originally posted by elescaller at 2011-07-15 14:50:26:
缓冲盐没有冲干净是不可以直接保存的，即使你用水相保存也不能保证里面的盐不会影响柱子。

我们用戴安的阴离子色谱柱 就是用低浓度的碳酸氢钠保存的呀
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16楼2011-07-15 14:53:12
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elescaller

铁杆木虫 (知名作家)

铁杆木虫 (无名作家)
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Originally posted by momojixing at 2011-07-15 14:53:12:
我们用戴安的阴离子色谱柱 就是用低浓度的碳酸氢钠保存的呀

离子交换柱和普通C18柱子不一样，我没用过。
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17楼2011-07-15 15:05:18
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momojixing

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by elescaller at 2011-07-15 15:05:18:
离子交换柱和普通C18柱子不一样，我没用过。

18楼2011-07-15 15:07:49
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xiami218

金虫 (小有名气)
★
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既然有盐，那就先用甲醇水（约10%）冲，后设置梯度过渡到甲醇冲一下就好了，不能直接用水冲，也不能直接用甲醇冲的，那样柱子就废了
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19楼2011-07-15 16:07:40
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hugh_811

金虫 (小有名气)
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Originally posted by yujiedong at 2011-07-14 22:49:21:
反相的，C18
请问，一般分成几个梯度？分别是多少？

可以先用10%甲醇走一两个柱体积，然后用一两个柱体积把甲醇含量升到95%，然后再走十个柱体积左右。。。。这个梯度你也可以根据自己的需求改动
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20楼2011-07-15 16:53:49
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