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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 酶切问题
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happywoheni

铁虫 (小有名气)

[求助] 酶切问题

我的引物两端设计了EcoR1和BamH1两个位点,但是T载体上也含这两个酶切位点，那怎么做单酶切呢？
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1楼 2011-07-13 17:07:39
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gwbk

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
amisking(金币+1): 鼓励应助 2011-07-13 20:53:07
happywoheni(金币+1): 2011-07-13 21:12:45
换个其他的酶切位点行吗？
你是要在引物的酶切位点切吗？
不大明白什么意思
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2楼2011-07-13 19:21:25
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
amisking(金币+1): 鼓励应助 2011-07-13 20:53:13
单切就不用这两个酶，用其他单一切点的酶。双酶切可以用。
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3楼2011-07-13 19:51:56
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happywoheni

铁虫 (小有名气)
我做TA克隆目的是测序，连接转化之后不是要酶切鉴定吗？我这种情况不知道怎么做酶切鉴定。
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4楼2011-07-13 21:14:27
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gwbk

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
西瓜(金币+3, EPI+1): Good！ 2011-07-13 22:13:37
直接用T载体上或者基因片段任何一个酶鉴定没问题的，单酶切如果有两个酶切位点就切出2条条带，根据你酶切位点位置计算出两个片段大小，如果是对的，说明你构建成功，就可以测序了
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5楼2011-07-13 21:21:08
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zgb1982

木虫 (正式写手)
★ ★
dhd997(金币+2): 鼓励交流 2011-07-14 12:24:55
都可以用的，只要切出的条带大小和理论预期的一样就行了。
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6楼2011-07-14 11:08:26
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