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happywoheni

铁虫 (小有名气)

[求助] 酶切问题

我的引物两端设计了EcoR1和BamH1两个位点,但是T载体上也含这两个酶切位点,那怎么做单酶切呢?
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happywoheni

铁虫 (小有名气)

我做TA克隆目的是测序,连接转化之后不是要酶切鉴定吗?我这种情况不知道怎么做酶切鉴定。
4楼2011-07-13 21:14:27
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gwbk

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


amisking(金币+1): 鼓励应助 2011-07-13 20:53:07
happywoheni(金币+1): 2011-07-13 21:12:45
换个其他的酶切位点行吗?
你是要在引物的酶切位点切吗?
不大明白什么意思
2楼2011-07-13 19:21:25
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


amisking(金币+1): 鼓励应助 2011-07-13 20:53:13
单切就不用这两个酶,用其他单一切点的酶。双酶切可以用。
3楼2011-07-13 19:51:56
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gwbk

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
西瓜(金币+3, EPI+1): Good! 2011-07-13 22:13:37
直接用T载体上或者基因片段任何一个酶鉴定没问题的,单酶切如果有两个酶切位点就切出2条条带,根据你酶切位点位置计算出两个片段大小,如果是对的,说明你构建成功,就可以测序了
5楼2011-07-13 21:21:08
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