24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 729  |  回复: 5
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

yanjing2001

银虫 (小有名气)

[交流] 基因克隆 已有3人参与

我做的是截短启动子片段(1.5kk~0.2kb)和pGL4.10连接:先做了TA克隆,测序正确后,提质粒双酶切后和载体片段连接,我试过了7:1和14:1进行连接,用的是takara的solution 1连接kit 16度连接16小时。目的片段双酶切和载体都没有问题,遇到的问题是转化后总是没有菌生长,希望不吝指导!非常感谢
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yanjing2001

银虫 (小有名气)

实在是找不到原因所在,高手再帮忙分析分析
6楼2011-07-12 17:39:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

青菜小虫

银虫 (著名写手)

风居住的街道

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
看天(金币+2): 鼓励交流 2011-07-11 16:27:33
你确定感受态没问题吗?还有体系,我一般是载体和目的片段solution 1分别是4:1:5。10ul体系。
生命即这般无尽变数,辗转来去皆苛求不得
3楼2011-07-11 14:29:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yesucao

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
感受态??抗生素及其浓度??还有就是你的载体1微升是不是太少了啊??做转化的时候是不是42°热激??不能高于42°???
4楼2011-07-11 21:20:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yanjing2001

银虫 (小有名气)

感谢大家的回帖帮助,我的TA克隆已经成功了,现在连目的载体失败!我用的7:1和14:1是出入片段与载体的摩尔比;抗生素Amp用100微克/ml;42度热激应该没问题;我做了转化阳性对照,感受态应该没问题!
5楼2011-07-12 17:35:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 300求调剂,材料科学英一数二 +10 leaflight 2026-03-24 10/500 2026-03-29 20:58 by goldfish51
[考研] 材料与化工328分调剂 +7 。,。,。,。i 2026-03-23 7/350 2026-03-29 20:58 by 唐沐儿
[考研] 275求调剂 +15 Micky11223 2026-03-25 20/1000 2026-03-29 20:44 by 唐沐儿
[考研] 调剂310 +12 温柔的晚安 2026-03-25 13/650 2026-03-29 20:01 by 无际的草原
[考研] 化学工程085602 305分求调剂 +22 RichLi_ 2026-03-25 22/1100 2026-03-29 19:51 by 无际的草原
[考研] 343求调剂 +6 爱羁绊 2026-03-29 6/300 2026-03-29 12:00 by 无际的草原
[考研] 本科双非材料,跨考一志愿华电085801电气,283求调剂,任何专业都可以 +6 芝士雪baoo 2026-03-28 8/400 2026-03-29 08:16 by 松花缸1201
[考研] 083000学硕274求调剂 +8 Li李鱼 2026-03-26 8/400 2026-03-28 20:33 by 加油向未来啊
[考研] 一志愿华北电力大学能动专硕,293,求调剂 +3 15537177284 2026-03-23 5/250 2026-03-28 16:11 by xxxsssccc
[考研] 一志愿中南大学化学0703总分337求调剂 +5 niko- 2026-03-27 5/250 2026-03-28 14:25 by 唐沐儿
[考研] 346求调剂 一志愿070303有机化学 +3 萝卜炖青菜 2026-03-28 3/150 2026-03-28 14:11 by 唐沐儿
[考研] 266分,求材料冶金能源化工等调剂 +7 哇呼哼呼哼 2026-03-27 9/450 2026-03-28 12:22 by zllcz
[考研] 一志愿南昌大学324求调剂 +7 hanamiko 2026-03-27 7/350 2026-03-28 09:56 by 李上岸0921
[考研] 材料求调剂一志愿哈工大324 +7 闫旭东 2026-03-28 9/450 2026-03-28 08:51 by Xu de nuo
[考研] 086000调剂 +3 7901117076 2026-03-26 3/150 2026-03-27 21:34 by Jianing_Mi
[考研] 333求调剂 +3 question挽风 2026-03-23 3/150 2026-03-27 11:29 by 不吃魚的貓
[考研] 一志愿陕师大生物学071000,298分,求调剂 +5 SYA! 2026-03-23 5/250 2026-03-27 09:29 by 不吃魚的貓
[考研] 调剂 +4 柚柚yoyo 2026-03-26 4/200 2026-03-26 20:43 by fmesaito
[考研] 考研一志愿苏州大学初始315(英一)求调剂 +3 sbdksD 2026-03-24 4/200 2026-03-25 18:16 by xcjcqu
[考研] 318求调剂 +3 plum李子 2026-03-23 3/150 2026-03-25 09:42 by 雾散后相遇lc
信息提示
请填处理意见