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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 紫外诱变
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879278

银虫 (小有名气)

[交流] 紫外诱变 已有7人参与

紫外诱变可不可以在超净台上做，是不是要在红灯下进行，如果没有红灯是不是可以罩上一块布，照射不同时间比如1min 2min，是不是到了1min把紫外灯关了，盖上盖子，不用拿出来，然后再继续照射1min
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微生物

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1楼 2011-07-09 10:24:39
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
★ ★ ★ ★ ★ ★
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scelab(金币+5, EPI+1): 谢谢交流 2011-07-09 18:07:08
紫外诱变必须在超净台中进行，因为在其它地方难以保证洁净和密闭。紫外线的穿透能力很弱，会被玻璃培养皿的盖子阻挡住一部分，所以诱变的时候应该不要用盖子。

紫外先的照射时间不是固定的，照射时间与致死率和突变率有关，一般都是要追求一定的致死率，而这个致死率菌株不同，照射时间也不同。你要做致死率的预备实验，一般是选择80%。

红光灯是怕光修复，经过紫外诱变之后不能接触日光灯和自然光，所以才要在红光灯下涂平板。紫外诱变的时候用紫外灯就行。诱变结束后开红光灯涂平板，完成之后应该避光培养。在紫外诱变的时候要避免接触日光灯和自然光，所以才要用帘子来密闭。

感觉楼主似乎没有做过，还有很多细节不清楚，尽管问吧。
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
4楼2011-07-09 17:36:32
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
★
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买红光灯管就行，查一下，总会有得卖的。微波诱变我不了解。
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6楼2011-07-10 04:42:46
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lyon2000000

金虫 (小有名气)
★ ★ ★
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scelab(金币+2): xxjl谢谢交流 2011-07-09 18:06:58
紫外诱变在超净台上做防污染，使用红灯防止光修复，照射一分钟就行了吧~盖上盖子后照射没效果
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2楼2011-07-09 10:52:59
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879278

银虫 (小有名气)
如果没有红灯的话，罩上布效果会怎么样，假设两个培养皿，一个照射1min一个照射2min，是不是同时放进去，到1min后关上紫外灯，把这个培养皿的盖子盖上，然后再打开紫外灯继续照射1min
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3楼2011-07-09 11:08:34
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879278

银虫 (小有名气)
是啊，我刚刚才开始做。因为实验室的超净台没有红光灯，所以我想是不是可以先涂平板，再诱变，然后偶用牛皮纸包起来，以减少接触自然光的机会，不知道这样是不是可以。
另外致死率的预备试验是怎么做的呢？
我还想做微波诱变，微波的话我看文献里有说每60s拿出来冷却一次（功率800），还有说每10s拿出来冷却一次（功率700），不知道哪个更靠谱一点，做微波的话，盖子应该也是开着的是吧，是不是也需要避光
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5楼2011-07-09 19:07:08
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879278

银虫 (小有名气)
好的，谢谢
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7楼2011-07-10 08:53:06
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hjxbjc

银虫 (小有名气)
★
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引用回帖:
Originally posted by 879278 at 2011-07-09 19:07:08:
是啊，我刚刚才开始做。因为实验室的超净台没有红光灯，所以我想是不是可以先涂平板，再诱变，然后偶用牛皮纸包起来，以减少接触自然光的机会，不知道这样是不是可以。
另外致死率的预备试验是怎么做的呢？
我还 ...

我也做紫外和微波诱变。你要先知道菌株原液的浓度，然后按照梯度稀释后用不同的浓度分别做同等时间的紫外诱变，之后得到相应的致死率。肯定是要先涂平板，再用紫外灯照射，没有红光灯就避光就行了，关上窗帘和灯。诱变解释后我是用黑色的卡纸把平皿包起来培养的。

   微波诱变我也做过好多次了，但是效果不理想。没有文献上说的那么神奇，要将已知浓度的菌液放在放满水的大烧杯里面，每20秒就要换一次大烧杯的水。也是依据时间的长短进行微波诱变。但是我最大做到过300秒的，最后菌长的还很好。我一直在想这个问题，是不是没有致死，也突变了呢。。再往下还没有做。

   微生物的诱变有一定的概率。祝你成功。以后还可一起交流。。这也是我论文中很总要的一部分。
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奔波在乳酸菌世界里的一只蜗牛——吃辣椒ing！！！
8楼2011-07-10 10:31:34
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879278

银虫 (小有名气)
将已知浓度的菌液放在放满水的大烧杯里面，每20秒就要换一次大烧杯的水，这个是把孢子悬浮液放到试管里，再把试管放到烧杯里吗？还有 微波诱变需要避光吗？用2层牛皮纸包效果会不会不太好？
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9楼2011-07-10 18:51:34
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
★
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看来你是想用微波诱变？我觉得只要你买了红光灯，还是可以做紫外诱变的。
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10楼2011-07-10 19:13:26
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