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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 测序的问题
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xp198766

铁杆木虫 (著名写手)

小木虫职业打酱油滴~~！
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
西瓜(金币+3): 鼓励交流 2011-07-10 21:35:33
我觉得，就是多挑几个克隆菌，先摇菌，再提质粒，再酶切，再连表达载体，再送去测序（留下原菌液），测序准确的，再用原菌液做表达——这是用T载体的情况；
如果你直接用的表达载体做的克隆的话，直接再挑几个送测序（保留原菌液），准确的再继续做下去啊。。
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21楼2011-07-10 20:44:55
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xp198766

铁杆木虫 (著名写手)

小木虫职业打酱油滴~~！
或者都做一下，看什么能表达出来。。。
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22楼2011-07-10 20:45:54
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friya0910

新虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by xp198766 at 2011-07-10 20:44:55:
我觉得，就是多挑几个克隆菌，先摇菌，再提质粒，再酶切，再连表达载体，再送去测序（留下原菌液），测序准确的，再用原菌液做表达——这是用T载体的情况；
如果你直接用的表达载体做的克隆的话，直接再挑几个送 ...

谢谢您的建议，我刚又把测序结果分析了一下，一共测得6条序列，貌似是两两一组，我觉得应该不是酶的问题，基因为多拷贝的可能性多一点，我决定把不一样的三条序列都做表达了，看看情况再说！还有想问一下您说的留原菌液是用甘油-80℃保存吧，用的时候划线挑单克隆再用吧！
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23楼2011-07-10 21:19:00
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xp198766

铁杆木虫 (著名写手)

小木虫职业打酱油滴~~！
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
我觉得，是不是放4度就可以了，就是等你测序结果回来差不多4天，菌应该不会挂，不用那么严格保存吧。。
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24楼2011-07-11 08:54:01
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生化番瓜
25楼2011-08-01 15:45:03
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