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xp198766

铁杆木虫 (著名写手)

小木虫职业打酱油滴~~!

★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
西瓜(金币+3): 鼓励交流 2011-07-10 21:35:33
我觉得,就是多挑几个克隆菌,先摇菌,再提质粒,再酶切,再连表达载体,再送去测序(留下原菌液),测序准确的,再用原菌液做表达——这是用T载体的情况;
如果你直接用的表达载体做的克隆的话,直接再挑几个送测序(保留原菌液),准确的再继续做下去啊。。
21楼2011-07-10 20:44:55
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xp198766

铁杆木虫 (著名写手)

小木虫职业打酱油滴~~!

或者都做一下,看什么能表达出来。。。
22楼2011-07-10 20:45:54
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friya0910

新虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by xp198766 at 2011-07-10 20:44:55:
我觉得,就是多挑几个克隆菌,先摇菌,再提质粒,再酶切,再连表达载体,再送去测序(留下原菌液),测序准确的,再用原菌液做表达——这是用T载体的情况;
如果你直接用的表达载体做的克隆的话,直接再挑几个送 ...

谢谢您的建议,我刚又把测序结果分析了一下,一共测得6条序列,貌似是两两一组,我觉得应该不是酶的问题,基因为多拷贝的可能性多一点,我决定把不一样的三条序列都做表达了,看看情况再说!还有想问一下您说的留原菌液是用甘油-80℃保存吧,用的时候划线挑单克隆再用吧!
23楼2011-07-10 21:19:00
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xp198766

铁杆木虫 (著名写手)

小木虫职业打酱油滴~~!


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
我觉得,是不是放4度就可以了,就是等你测序结果回来差不多4天,菌应该不会挂,不用那么严格保存吧。。
24楼2011-07-11 08:54:01
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25楼2011-08-01 15:45:03
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