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zhanggxfly

金虫 (小有名气)

[求助] 请问免疫荧光双标一抗二抗可以同时加入吗

免疫荧光双标时的几个问题:

1.一抗可以同时加吗?二抗可以同时加吗?抗体先后加有什么差异呢?
抗体能同时加当然好,省事,但能保证两种抗体都是最佳条件吗?如果不同时加一抗,考虑什么因素确定谁先加呢?二抗呢?是不是应该考虑荧光淬灭时间?荧光持续短的后加?
2、一抗一定是不同来源的,二抗可以同来源吗?
选择4中来源的抗体可以避免抗体间的交叉反应,而二抗相同可以选择同一种封闭剂。买抗体如何选择?怎样才好?
3、请问某二抗的“工作效价 1:10”是什么意思啊?

恳请指点~~
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biolinkphila

新虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★ ★ ★
amisking(金币+3): 鼓励应助 2011-07-06 12:35:58
silicare(金币+3): 楼主奖励的 2011-07-08 11:08:50
荧光双染条件摸索难度较高,很容易造成高背景,可以尝试外包。
二抗来源可以相同。
工作效价1:10应该是说抗体在实验时要稀释10倍才能使用。
3楼2011-07-05 09:14:31
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lxfbsh2003

金虫 (小有名气)

没遇到过这种问题,我们的实验都是只用一种一抗和尔康的,我也很想了解此问题,请高手帮忙解决
2楼2011-07-04 21:55:35
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zhanggxfly

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by biolinkphila at 2011-07-05 09:14:31:
荧光双染条件摸索难度较高,很容易造成高背景,可以尝试外包。
二抗来源可以相同。
工作效价1:10应该是说抗体在实验时要稀释10倍才能使用。

非常感谢你的回答,请问“外包”是什么意思啊?怎么做呢
我想不断进步
4楼2011-07-05 12:05:55
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zhanggxfly

金虫 (小有名气)

silicare: 想奖励谁,几个BB,我帮你转移 2011-07-07 17:39:20
我想奖励回窝帖的战友,可是显示:
'当前回帖不是应助回帖,您不能对此进行金币奖励哦 "
我想不断进步
5楼2011-07-07 09:03:25
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