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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 请问免疫荧光双标一抗二抗可以同时加入吗
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zhanggxfly

金虫 (小有名气)

[求助] 请问免疫荧光双标一抗二抗可以同时加入吗

免疫荧光双标时的几个问题：

1.一抗可以同时加吗？二抗可以同时加吗？抗体先后加有什么差异呢？
抗体能同时加当然好，省事，但能保证两种抗体都是最佳条件吗？如果不同时加一抗，考虑什么因素确定谁先加呢？二抗呢？是不是应该考虑荧光淬灭时间？荧光持续短的后加？
2、一抗一定是不同来源的，二抗可以同来源吗？
选择4中来源的抗体可以避免抗体间的交叉反应，而二抗相同可以选择同一种封闭剂。买抗体如何选择？怎样才好？
3、请问某二抗的“工作效价 1:10”是什么意思啊？

恳请指点~~
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我想不断进步
1楼 2011-07-04 15:25:45
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lxfbsh2003

金虫 (小有名气)
没遇到过这种问题，我们的实验都是只用一种一抗和尔康的，我也很想了解此问题，请高手帮忙解决
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2楼2011-07-04 21:55:35
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biolinkphila

新虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★ ★
amisking(金币+3): 鼓励应助 2011-07-06 12:35:58
silicare(金币+3): 楼主奖励的 2011-07-08 11:08:50
荧光双染条件摸索难度较高，很容易造成高背景，可以尝试外包。
二抗来源可以相同。
工作效价1：10应该是说抗体在实验时要稀释10倍才能使用。
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3楼2011-07-05 09:14:31
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zhanggxfly

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by biolinkphila at 2011-07-05 09:14:31:
荧光双染条件摸索难度较高，很容易造成高背景，可以尝试外包。
二抗来源可以相同。
工作效价1：10应该是说抗体在实验时要稀释10倍才能使用。

非常感谢你的回答，请问“外包”是什么意思啊？怎么做呢
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我想不断进步
4楼2011-07-05 12:05:55
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zhanggxfly

金虫 (小有名气)
silicare: 想奖励谁，几个BB，我帮你转移 2011-07-07 17:39:20
我想奖励回窝帖的战友，可是显示：
'当前回帖不是应助回帖，您不能对此进行金币奖励哦 "
赞一下(1人) 回复此楼
我想不断进步
5楼2011-07-07 09:03:25
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