应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » cDNA做普通PCR扩不出条带来
52/1返回列表
查看: 4278  |  回复: 13
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

jinglilv

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
1楼 2011-07-04 14:50:28
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jinglilv

禁虫 (小有名气)
送鲜花一朵
本帖内容被屏蔽
12楼2012-05-09 19:55:34
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答

喇叭

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
jinglilv(金币+2): 谢谢 2011-07-04 17:16:12
dhd997(金币+3): good 2011-07-04 18:01:09
应该是反转录的时候就没有cDNA,最大的可能性是提取RNA时RNA被降解了，我以前也出现过这种情况，重新提取RNA再做，每一步都小心一点，一帮都没有问题，还有就是你的cDNA有没有对照试验，例如actin
加油吧，做分子的就是这样
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2011-07-04 15:00:01
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

beautybanana

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): good 2011-07-04 18:01:29
质粒上的基因在肿瘤细胞里表达了没有呢？是否先要检测一下所表达的蛋白啊，如果没有被表达，是不是就得不到相应的cDNA啊？在做PCR就没有产物了呢？我没有做过这，猜测一下的。
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2011-07-04 16:03:19
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wulishu

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
dhd997(金币+5): 热心 2011-07-04 18:01:41
1。检查提取RNA是否有降解，吸光度和电泳图都要看，而且吸光度一定要达到要求，另外你在溶解RNA的时候是否有酒精残留（残留有可能会影响你后续实验）
2。反应体系要按照说明书配制，建议不要自己修改（酶和其他试剂的量），还要注意例如dNTP的浓度与说明书里让加入的是否一致，如果有条件的话建议你用公司事先预混好的酶
3。退火温度过高或过低也有可能得不到目的条带，参照Tm值做一下梯度试试

我遇到过和你差不多的情况，仅供参考
赞一下(4人) 回复此楼
4楼2011-07-04 16:41:26
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭