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congyunxy

铜虫 (初入文坛)

[求助] 溶液中EDTA的消除

我在一个试剂公司订购了siRNA的干扰片段用于显微注射,但是这个片段的溶液中含有EDTA,EDTA能够螯合钙离子,而钙离子对于卵母细胞的成熟有非常重要的影响。请问大家有什么方法来消除EDTA的影响,我打算在这个溶液中加入等浓度的氯化钙来消除EDTA的影响,但是有人说这样是万万不可以的,请教大家的好方法及建议,谢谢
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优雅转身

荣誉版主 (著名写手)

【答案】应助回帖

调节溶液的ph,尽量在酸性条件下。因为EDTA跟钙离子在碱性条件下才能络合,尤其是是ph将近为10的时候络合作用是最好的。
选择,没有错!
2楼2011-07-02 09:50:15
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嘉敏

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

先用锌去测定里面的EDTA的含量,然后加入相应的钙去消除EDTA的影响
3楼2011-07-02 10:04:44
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congyunxy

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by 优雅转身 at 2011-07-02 09:50:15:
调节溶液的ph,尽量在酸性条件下。因为EDTA跟钙离子在碱性条件下才能络合,尤其是是ph将近为10的时候络合作用是最好的。

这个溶液的PH为8,含有1mM的EDTA,每次实验的时候我取出7微升该溶液,然后加入7微升1mM的氯化钙溶液来消除EDTA的作用,请问这种方法可不可取啊
4楼2011-07-02 10:20:54
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congyunxy

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by 嘉敏 at 2011-07-02 10:04:44:
先用锌去测定里面的EDTA的含量,然后加入相应的钙去消除EDTA的影响

EDTA的含量为1mM,溶液PH为8,我加等体积等浓度的氯化钙溶液可以消除EDTA的作用吗
5楼2011-07-02 10:23:11
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嘉敏

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
Originally posted by congyunxy at 2011-07-02 10:23:11:
EDTA的含量为1mM,溶液PH为8,我加等体积等浓度的氯化钙溶液可以消除EDTA的作用吗

PH为8,很难络合,你尝试加热,看能否络合
6楼2011-07-02 10:42:24
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congyunxy

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by 嘉敏 at 2011-07-02 10:42:24:
PH为8,很难络合,你尝试加热,看能否络合

加热的话是通过水浴还是在酒精灯上加热啊,因为我的实验材料是核酸,高温会对我的实验材料产生影响
7楼2011-07-02 10:47:01
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嘉敏

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
Originally posted by congyunxy at 2011-07-02 10:47:01:
加热的话是通过水浴还是在酒精灯上加热啊,因为我的实验材料是核酸,高温会对我的实验材料产生影响

水浴,不用长时间加热的,我之前做过一个,第二天才反应
8楼2011-07-02 10:55:43
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congyunxy

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by 嘉敏 at 2011-07-02 10:55:43:
水浴,不用长时间加热的,我之前做过一个,第二天才反应

要是想完全消除EDTA的作用的话大概需要37度水浴多久,两个小时够不?并且我水浴完成以后马上就要用于下一步的实验
9楼2011-07-02 11:24:31
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嘉敏

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

congyunxy(金币+10): 谢谢你的回答 2011-07-02 11:53:14
引用回帖:
Originally posted by congyunxy at 2011-07-02 11:24:31:
要是想完全消除EDTA的作用的话大概需要37度水浴多久,两个小时够不?并且我水浴完成以后马上就要用于下一步的实验

我觉得有点难完全没有,你得取出来重新测EDTAD的残余量
10楼2011-07-02 11:42:57
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