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肉丸001

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[求助] 质粒图谱阅读

最近刚接触真核质粒,发现其结构好复杂,各种promoter,各种poly(A),看得很闹心,也不知道其在这个质粒中具体是啥作用的,求高手解析,求分享质粒谱图阅读的相关文献及书本。

pcDNA 3 :
CMV promoter: bases 209-863
T7 promoter: bases 864-882
Polylinker: bases 889-994
Sp6 promoter: bases 999-1016
BGH poly A: bases 1018-1249
SV40 promoter: bases 1790-2115
SV40 origin of replication: bases 1984-2069
Neomycin ORF: bases 2151-2945
SV40 poly A: bases 3000-3372
ColE1 origin: bases 3632-4305
Ampicillin ORF: bases 4450-5310
这里面的promoter作用分别什么,BGH poly A,SV40 poly A(有的质粒中还有synthetic poly(A) signal)有什么区别,SV40 origin of replication与ColE1 origin有啥不同?
有的质粒图谱中
谢谢[ Last edited by 肉丸001 on 2011-7-1 at 11:32 ]
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iaminxanadu

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
silicare(金币+3, EPI+1): 鼓励发帖交流 2011-07-02 14:52:06
肉丸001(金币+5): 谢谢。。。虽然我还是没怎么弄懂 2011-07-03 11:26:58
都是为了维持筛选标记、在不同宿主中复制、表达啊。
具体的自己动手查一下就知道了。

Promoter 就是启动子,在不同用途,不同宿主中启动转录。(比如T7 Promoter,为了高表达某些蛋白,在某些宿主表达的T7 RNA聚合酶识别后启动,而CMV promoter 真核中启动转录)
polyA就是转录终止信号。SV40 origin of replication与ColE1 origin一个是原核大肠杆菌复制起始点,一个是表达SV40 T抗原的真核宿主中复制起始。
2楼2011-07-02 09:53:16
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