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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 质粒酶切后消失了
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bigplantgirl

铜虫 (初入文坛)

[求助] 质粒酶切后消失了

最近把目的基因连到了pPIC9K质粒上，要转化毕赤酵母，转化之前用SalI酶切线性化，电泳检测重组质粒没有问题，但是空质粒酶切后就什么片段都没有了，没有酶切的空质粒电泳后是有条带的，请教各位高手这会是什么原因呢？我已经做了3遍了，每次都一样。图上左起一次是没有酶切的重组质粒、酶切后的重组质粒、marker、酶切后的空质粒、没有酶切的空质粒。
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1楼 2011-06-30 18:07:09
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charles08

铁杆木虫 (著名写手)
问题解决了吗？我是试剂盒抽提的质粒
空质粒双酶切后出现消失的情况。另外，我将空载体PACYC电泳后产物回收放置3天也存在带变弱或者消失的情况
不知您最后是怎么解决的 。谢谢
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12楼2013-05-07 17:26:40
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yandz680717

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
1949stone(金币+1): 鼓励 2011-07-01 21:30:00
bigplantgirl(金币+1): 2011-07-06 19:02:33
空载体提取时，用酚-氯仿抽提没有？
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2楼2011-06-30 18:58:13
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bigplantgirl

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by yandz680717 at 2011-06-30 18:58:13:
空载体提取时，用酚-氯仿抽提没有？

我是用试剂盒提取的，没有用酚-氯仿抽提，和这个有关吗？
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3楼2011-06-30 20:54:26
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hooroberts

新虫 (小有名气)
酶切了多久，可能切过了
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4楼2011-06-30 21:10:48
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