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孢子悬浮液的制备和浓度调制
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| 要制作霉菌的孢子悬浮液，请问有没有人做过啊？我看有人把菌分别接到斜面和麸曲培养基中，在刮孢子制成孢子悬浮液。请问两者有什么区别？还有孢子悬浮液的浓度用分光光度计调节的具体方法是什么呢？本人刚刚开始接触霉菌，这方面的知识相当贫乏。 |
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 菌种 |
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gaoqian8717
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rainwander(金币+3): 鼓励交流 2011-06-29 22:41:21
rainwander(金币+3): 鼓励交流 2011-06-29 22:41:21
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一般的文献中获得孢子悬浮液都是冲洗斜面得到的，如果在斜面上正常不是足够好而在麸皮培养基中生长良好的话也可以用麸皮培养的，如果斜面上生长已经足够好可以获得大量的袍子就没必要用麸皮培养了。 如果是在斜面上培养，就在斜面中加入20毫升左右的无菌生理盐水，然后摇晃充分冲洗孢子，然后在超净工作台中将冲洗液用一层无菌脱脂棉进行过滤（因为冲洗液中含有一定量的菌丝），将袍子滤液中加入几颗无菌玻璃球，然后摇床震荡使成团的孢子打散。如果是用麸皮培养的话，也需要在培养后的麸皮中加入一定量的无菌生理盐水，然后过滤，其他步骤同刚才所述。 要计算孢子数量并调节孢子浓度的话，我建议还是直接使用血球计数板，利用油镜直接观察计数，观察效果很明显的。用分光光度计测的话，您首先需要调制已知浓度的不同级别的孢子悬浮液做出一条标准曲线，而且比浊法受仪器本身，天气气候等的影响较大，今天的结果和第二天的都存在差别，最好还是用血球计数板。 祝你顺利 |
5楼2011-06-29 19:13:01
