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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 鼠尾胶原的灭菌
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纯渴

金虫 (正式写手)

[求助] 鼠尾胶原的灭菌

各位虫友，我要做大鼠原代肝的培养，需要用到鼠尾胶原，在配置中把冰醋酸的浓度弄成的0.5%（原本应该是0.1%）不知道有没有影响，还有是冰醋酸没有灭过菌的，整个操作在外面火焰旁操作的，不知道这样的操作会不会染菌
   还有就是离心后的胶原到底能不能高压的
   有一种想法，把离心后的上清冷冻，在真空干燥成粉末，紫外灭菌——这方法可行不（主要考虑是否会染菌）
   最后想问下，大家铺板时胶原的浓度一般多少的（按书上配法原液的浓度是20mg/ml)
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1楼 2011-06-28 17:20:06
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xxzcf

铁杆木虫 (小有名气)
引用回帖:
14楼: Originally posted by whpyykl at 2012-03-07 04:21:26:
你好，0.1%的HAc是什么意思呢？
是不是指，在100mL添加醋酸后的溶液中含有0.1g醋酸呢？对这个概念一直不是很理解，希望得到指点，谢谢。

如果你的醋酸是100%的冰醋酸，那么是的。也可以算摩尔浓度，也有很多文献写0.1-0.5M的醋酸溶液，那么其实差不多是0.3%-1.5%的1样子，其实溶解起来就是速度的问题，pH差不多在2.8-3.5左右，破坏氢键之类的作用，将胶原的纤维分开，但是酸水解还是很明显的，所以时间越长，酸浓度越高，水解越明显，明胶成分越多。
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15楼2012-03-07 15:42:53
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luzeyan

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

可以抽滤，这种方法简便一些
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2楼2011-06-28 20:36:51
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纯渴

金虫 (正式写手)
这么抽滤呢，滤纸都要灭菌吗，而且这样的装置都是在外面的，不是会染菌吗，如果可以做，请教下具体步骤
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3楼2011-06-29 11:10:16
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大漠挥刀

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
silicare(金币+10): 处女帖，鼓励交流 2011-06-29 16:58:30
silicare(EPI+1): 2011-06-29 16:58:45
由于胶原粘度较大，难以滤过除菌。
在醋酸中处理完，4000转离心30min 吸取上清，经67.55KPa（115.6度）高压灭菌10min后分装，-20保存。
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4楼2011-06-29 13:51:12
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