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鼠尾胶原的灭菌
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各位虫友,我要做大鼠原代肝的培养,需要用到鼠尾胶原,在配置中把冰醋酸的浓度弄成的0.5%(原本应该是0.1%)不知道有没有影响,还有是冰醋酸没有灭过菌的,整个操作在外面火焰旁操作的,不知道这样的操作会不会染菌 还有就是离心后的胶原到底能不能高压的 有一种想法,把离心后的上清冷冻,在真空干燥成粉末,紫外灭菌——这方法可行不(主要考虑是否会染菌) 最后想问下,大家铺板时胶原的浓度一般多少的(按书上配法原液的浓度是20mg/ml) |
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【答案】应助回帖
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amisking(金币+7, EPI+1): 鼓励新虫发帖交流。 2011-07-05 22:39:38
纯渴(金币+7): 谢谢 2011-07-09 09:54:28
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| 胶原蛋白不能高压灭菌,本身胶原蛋白就是对温度敏感的蛋白,60°左右就会变性的,一般都尽量不在室温操作。过滤除菌也不行,胶原白白分子量还是比较大的,过滤不过去。如果你现在是液体,最好使用透析的方法除菌。就是用无菌的醋酸溶液反复的透析3-5次,因该就没问题了。我就是这样做的。另外还有一个方法,就是冷冻干燥后用无菌的醋酸溶液溶解即可,但是必须保证冷冻整个过程是无菌操作的。 |
9楼2011-07-05 22:12:07
luzeyan
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5楼2011-06-30 11:30:52
lzeyan
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6楼2011-07-03 18:20:50
lzeyan
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