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鼠尾胶原的灭菌
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各位虫友，我要做大鼠原代肝的培养，需要用到鼠尾胶原，在配置中把冰醋酸的浓度弄成的0.5%（原本应该是0.1%）不知道有没有影响，还有是冰醋酸没有灭过菌的，整个操作在外面火焰旁操作的，不知道这样的操作会不会染菌 还有就是离心后的胶原到底能不能高压的 有一种想法，把离心后的上清冷冻，在真空干燥成粉末，紫外灭菌——这方法可行不（主要考虑是否会染菌） 最后想问下，大家铺板时胶原的浓度一般多少的（按书上配法原液的浓度是20mg/ml) |
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【答案】应助回帖
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amisking(金币+7, EPI+1): 鼓励新虫发帖交流。 2011-07-05 22:39:38
纯渴(金币+7): 谢谢 2011-07-09 09:54:28
amisking(金币+7, EPI+1): 鼓励新虫发帖交流。 2011-07-05 22:39:38
纯渴(金币+7): 谢谢 2011-07-09 09:54:28
| 胶原蛋白不能高压灭菌，本身胶原蛋白就是对温度敏感的蛋白，60°左右就会变性的，一般都尽量不在室温操作。过滤除菌也不行，胶原白白分子量还是比较大的，过滤不过去。如果你现在是液体，最好使用透析的方法除菌。就是用无菌的醋酸溶液反复的透析3-5次，因该就没问题了。我就是这样做的。另外还有一个方法，就是冷冻干燥后用无菌的醋酸溶液溶解即可，但是必须保证冷冻整个过程是无菌操作的。 |
9楼2011-07-05 22:12:07
luzeyan
金虫 (小有名气)
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- 专业: 微生物生理与生物化学
2楼2011-06-28 20:36:51
3楼2011-06-29 11:10:16
4楼2011-06-29 13:51:12
