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喵汪

银虫 (小有名气)

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[交流] 化学虫前来请教：protein A/G,二抗

做实验要用到啥融合蛋白，还有二抗。文献上写的是recombinant fusion Protein A/G (1:1 in moles) ，我看一些生物公司产品目录里都是protein a，这个是分别买来protein a和g，然后自己混合，还是这就是一种叫protein A/G的物质呢？
还有，一抗是可替宁抗体，二抗应该买什么，必须是文献中用的F(ab)2 fragment of goat anti-mouse IgG吗？
还有这些生物药品使用和保存中有什么特殊要求和需要注意的地方？要不要纯化走柱子啥的？
我是外行，提的问题可能有些低级，还望各位虫友不吝赐教！

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1楼 2011-06-24 17:04:36

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zsy1106

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★ ★
lstt09nk(金币+2): 很热心 2011-06-25 11:26:36

有啊，大鼠英文是RAT，学名Rattus norvegicus,小鼠英文是mouse，学名：mus musculus，二者在应用领域上有重叠也有不同，抗体制备一般多用小鼠。
至于大鼠和小鼠的具体差别，和楼主的实验貌似相关性不大，楼主有兴趣的话我可以发资料给你看。

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7楼2011-06-25 11:02:47

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zsy1106

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★ ★ ★ ★
喵汪(金币+1):谢谢参与
amisking(金币+3, EPI+1): 鼓励应助 2011-06-24 20:08:34

蛋白A和蛋白G是两种不同的蛋白，是两种不同的分子。
recombinant fusion Protein A/G (1:1 in moles)这种说法我没有见过，字面意思像是把两个蛋白融合到一起表达，不是简单的混合，而是成为一种分子。
一抗是可替宁抗体，二抗是什么，这个关键不在可替宁上，而是可替宁的这个一抗是用什么制备的？如果是鼠源，二抗就用goat anti-mouse ，这边的关键就是鼠，不仅可以是羊抗鼠，也可以是兔抗鼠，等等。一抗一般在楼主提的这种情况下指的是
IgG，那么就用goat anti-mouse IgG就可以了，不一定非要是F(ab)2 fragment of goat anti-mouse IgG，后者只是前者的片段。但1抗还有可能是IgM，这时，你的二抗就要换了，例如goat anti-mouse IgM。最后，上面提到的Protein A和G ，这两种蛋白可以和多数的哺乳动物的IgG结合，如果楼主的一抗是鼠源可替宁抗体，那么这两种蛋白均可作为二抗来用。
讲了一大篇，希望不要把楼主弄糊涂了才好。