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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 化学虫前来请教：protein A/G,二抗
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喵汪

银虫 (小有名气)

[交流] 化学虫前来请教：protein A/G,二抗

做实验要用到啥融合蛋白，还有二抗。文献上写的是recombinant fusion Protein A/G (1:1  in moles) ，我看一些生物公司产品目录里都是protein a，这个是分别买来protein a和g，然后自己混合，还是这就是一种叫protein A/G的物质呢？
还有，一抗是可替宁抗体，二抗应该买什么，必须是文献中用的F(ab)2 fragment of goat anti-mouse IgG吗？
还有这些生物药品使用和保存中有什么特殊要求和需要注意的地方？要不要纯化走柱子啥的？
我是外行，提的问题可能有些低级，还望各位虫友不吝赐教！
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1楼 2011-06-24 17:04:36
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zsy1106

金虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★
喵汪(金币+1):谢谢参与
amisking(金币+3, EPI+1): 鼓励应助 2011-06-24 20:08:34
蛋白A和蛋白G是两种不同的蛋白，是两种不同的分子。
recombinant fusion Protein A/G (1:1  in moles)这种说法我没有见过，字面意思像是把两个蛋白融合到一起表达，不是简单的混合，而是成为一种分子。
一抗是可替宁抗体，二抗是什么，这个关键不在可替宁上，而是可替宁的这个一抗是用什么制备的？如果是鼠源，二抗就用goat anti-mouse ，这边的关键就是鼠，不仅可以是羊抗鼠，也可以是兔抗鼠，等等。一抗一般在楼主提的这种情况下指的是
IgG，那么就用goat anti-mouse IgG就可以了，不一定非要是F(ab)2 fragment of goat anti-mouse IgG，后者只是前者的片段。但1抗还有可能是IgM，这时，你的二抗就要换了，例如goat anti-mouse IgM。最后，上面提到的Protein A和G ，这两种蛋白可以和多数的哺乳动物的IgG结合，如果楼主的一抗是鼠源可替宁抗体，那么这两种蛋白均可作为二抗来用。
讲了一大篇，希望不要把楼主弄糊涂了才好。
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2楼2011-06-24 18:46:01
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zsy1106

金虫 (小有名气)
喵汪(金币+5): 2011-06-25 09:32:20
哦，忘记说了，Protein A和G虽然可以当做二抗来用，但他们本身均不是抗体。
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3楼2011-06-24 18:53:12
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喵汪

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by zsy1106 at 2011-06-24 18:53:12:
哦，忘记说了，Protein A和G虽然可以当做二抗来用，但他们本身均不是抗体。

很好很好，我明白了。
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4楼2011-06-25 09:33:08
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喵汪

银虫 (小有名气)
对了，大鼠跟小鼠有区别吗？
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5楼2011-06-25 10:30:26
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snoopyzxx

木虫 (著名写手)
★ ★
喵汪(金币+1):谢谢参与
lstt09nk(金币+1): 鼓励交流 2011-06-25 11:26:08
蛋白A和G在免疫学里面一般是用来纯化抗体的，他们对某些类型的抗体都有特异性结合。
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6楼2011-06-25 10:57:14
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zsy1106

金虫 (小有名气)
★ ★
lstt09nk(金币+2): 很热心 2011-06-25 11:26:36
有啊，大鼠英文是RAT，学名Rattus norvegicus,小鼠英文是mouse，学名：mus musculus，二者在应用领域上有重叠也有不同，抗体制备一般多用小鼠。
至于大鼠和小鼠的具体差别，和楼主的实验貌似相关性不大，楼主有兴趣的话我可以发资料给你看。
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7楼2011-06-25 11:02:47
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Forever诺言

铜虫 (初入文坛)
★
喵汪(金币+1): 谢谢参与
引用回帖:
1557170楼: Originally posted by zsy1106 at 2011-06-24 18:46:01
蛋白A和蛋白G是两种不同的蛋白，是两种不同的分子。
recombinant fusion Protein A/G (1:1  in moles)这种说法我没有见过，字面意思像是把两个蛋白融合到一起表达，不是简单的混合，而是成为一种分子。
一抗是可替 ...

请教一下，以家禽器官内的活性因子为抗原抗小鼠得到的一抗是IgG还是IgM呢？
目前能查到的我所做的活性因子的中文文献资料太少了，不知道该怎么办了。。。
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8楼2013-03-19 15:35:58
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QsgQgy

新虫 (初入文坛)
★
喵汪(金币+1): 谢谢参与
我也在关注protein a用作二抗，希望能得到致电
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9楼2015-09-22 20:37:54
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