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喵汪

银虫 (小有名气)


[交流] 化学虫前来请教:protein A/G,二抗

做实验要用到啥融合蛋白,还有二抗。文献上写的是recombinant fusion Protein A/G (1:1  in moles) ,我看一些生物公司产品目录里都是protein a,这个是分别买来protein a和g,然后自己混合,还是这就是一种叫protein A/G的物质呢?
还有,一抗是可替宁抗体,二抗应该买什么,必须是文献中用的F(ab)2 fragment of goat anti-mouse IgG吗?
还有这些生物药品使用和保存中有什么特殊要求和需要注意的地方?要不要纯化走柱子啥的?
我是外行,提的问题可能有些低级,还望各位虫友不吝赐教!
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zsy1106

金虫 (小有名气)


喵汪(金币+5): 2011-06-25 09:32:20
哦,忘记说了,Protein A和G虽然可以当做二抗来用,但他们本身均不是抗体。
3楼2011-06-24 18:53:12
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zsy1106

金虫 (小有名气)


★ ★ ★ ★
喵汪(金币+1):谢谢参与
amisking(金币+3, EPI+1): 鼓励应助 2011-06-24 20:08:34
蛋白A和蛋白G是两种不同的蛋白,是两种不同的分子。
recombinant fusion Protein A/G (1:1  in moles)这种说法我没有见过,字面意思像是把两个蛋白融合到一起表达,不是简单的混合,而是成为一种分子。
一抗是可替宁抗体,二抗是什么,这个关键不在可替宁上,而是可替宁的这个一抗是用什么制备的?如果是鼠源,二抗就用goat anti-mouse ,这边的关键就是鼠,不仅可以是羊抗鼠,也可以是兔抗鼠,等等。一抗一般在楼主提的这种情况下指的是
IgG,那么就用goat anti-mouse IgG就可以了,不一定非要是F(ab)2 fragment of goat anti-mouse IgG,后者只是前者的片段。但1抗还有可能是IgM,这时,你的二抗就要换了,例如goat anti-mouse IgM。最后,上面提到的Protein A和G ,这两种蛋白可以和多数的哺乳动物的IgG结合,如果楼主的一抗是鼠源可替宁抗体,那么这两种蛋白均可作为二抗来用。
讲了一大篇,希望不要把楼主弄糊涂了才好。
2楼2011-06-24 18:46:01
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喵汪

银虫 (小有名气)


引用回帖:
Originally posted by zsy1106 at 2011-06-24 18:53:12:
哦,忘记说了,Protein A和G虽然可以当做二抗来用,但他们本身均不是抗体。

很好很好,我明白了。
4楼2011-06-25 09:33:08
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喵汪

银虫 (小有名气)


对了,大鼠跟小鼠有区别吗?
5楼2011-06-25 10:30:26
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