| 查看: 3900 | 回复: 13 | ||||
| 本帖产生 2 个 BioEPI ，点击这里进行查看 | ||||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||||
[交流]
聚乙二醇浓缩蛋白对蛋白的影响
|
||||
|
一直在用20000的聚乙二醇浓缩我的蛋白，方法是这样的，我的蛋白通过硫酸铵沉淀后，袋里水很多，将聚乙二醇晶体洒在透析袋（排阻3500）上，直到析出水分达到要求为止。 今天逛论坛，看到有人说聚乙二醇虽然分子量大，但这种浓缩方法也可能使一部分进入到透析袋中，想问问，聚乙二醇与蛋白质接触，会对蛋白质产生影响吗？我这种浓缩直接撒晶体的方法，对我的蛋白会有变性等影响吗？我的蛋白主要是碱性蛋白。谢了 |
回复此楼» 猜你喜欢
交叉科学部支持青年基金，对三无青椒是个机会吗？
已经有3人回复
-
国家级人才课题组招收2026年入学博士
已经有5人回复
-
Fe3O4@SiO2合成
已经有6人回复
-
青年基金C终止
已经有4人回复
-
青椒八年已不青，大家都被折磨成啥样了？
已经有7人回复
-
为什么nbs上溴 没有产物点出现呢
已经有10人回复
-
救命帖
已经有11人回复
-
招博士
已经有5人回复
-
26申博求博导推荐-遥感图像处理方向
已经有4人回复
-
限项规定
已经有7人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 如何除去蛋白质中的聚乙二醇？？？
已经有7人回复
- 【求助/交流】蛋白溶液浓缩
已经有32人回复
- 【求助】蛋白质用聚乙二醇浓缩后有沉淀，是怎么回事啊？
已经有5人回复
- 【求助/交流】如何分开聚乙二醇和蛋白质
已经有6人回复
- 聚乙二醇浓缩蛋白
已经有6人回复
» 抢金币啦！回帖就可以得到:
-
nanomaterials特刊：纳米材料在电化学能源领域的应用（SCI 中科院三区，IF4.5）征稿
+5/245
-
招聘启事 江南大学乳品加工与营养健康团队博士后招聘
+2/110
-
美国R1大学--德克萨斯大学埃尔帕索分校（UTEP） 土木、环境与建筑工程系 博士招生
+1/83
-
中南林业科技大学-自然资源与生态环境管理-申请-考核制博士生招生（导师本人发布）
+1/79
-
【2026/2027 哈工大计算机类博士招生】
+1/78
-
南方医科大学发育生物学教研室夏来新教授课题组招收26级博士研究生
+1/77
-
南京林业大学特聘教授招聘博后和博士研究生
+1/75
-
广东工业大学自动化学院鲁仁全教授团队刘勇华老师招收2026年博士研究生（申请制）
+1/74
-
大连理工大学智能系统实验室优秀硕博研究生招生
+1/72
-
征婚
+1/63
-
西交利物浦大学黄彪院士招收26年全奖博士生1名（工业智能方向）
+1/29
-
2026湖南科技大学化学化工学院招新能源电池方向博士生
+1/28
-
【青岛大学】2026年生物与医药博士生招生（含少数民族骨干人才）
+1/28
-
华中科技大学周英教授招博后
+1/27
-
辽宁材料实验室框架复合材料课题组招收联合培养研究生（长期有效）
+2/18
-
美国密苏里大学堪萨斯城分校（UMKC）生物材料诚聘全奖博士
+1/11
-
英国埃克塞特大学联合培养博士,访问学者, 博后依托申请
+1/5
-
顾敏院士课题组招收2026级光学工程专业博士研究生-上海理工大学智能科技学院
+1/3
-
南开大学齐迹课题组诚聘分子生物学、免疫学、有机分子合成相关方向的博士后和研究生
+1/1
-
中南民族大学-国家级领军人才团队超支化聚合物方向2026年博士研究生招生
+1/1
9楼2011-11-22 09:19:09
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
nayitian_nan(金币+1): 谢谢，还好，我用的是水溶液，里外都是~ 2011-06-24 17:02:35
amisking(金币+3): 鼓励应助 2011-06-24 20:08:56
silicare(EPI+1): 2011-06-25 09:06:16
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
nayitian_nan(金币+1): 谢谢，还好，我用的是水溶液，里外都是~ 2011-06-24 17:02:35
amisking(金币+3): 鼓励应助 2011-06-24 20:08:56
silicare(EPI+1): 2011-06-25 09:06:16
|
一般来说这样做不会有影响。楼主担心的话，可以试试别的方法啊。例如： 1、蛋白浓缩管——快且保险的方法； 2、用电风扇对着透析袋吹，或者实验室如果有抽干室或者干燥室，放进去，过一段时间去看看，水分就会少掉很多，虽然方法有点土，但是能用（我用过），但是这样做要注意的是，要求一定要低温保存的蛋白谨慎操作，毕竟电风扇不能放进冰箱，抽干室即使有空调温度也不会很低。 还有就是注意水分去掉后，除了蛋白浓缩了外，缓冲液的离子浓度之类的也会改变，有需要的话记得要调回去。 |
2楼2011-06-24 15:40:04
冼亮淀粉酶
专家顾问 (知名作家)
-
专家经验: +248 - BioEPI: 73
- 应助: 257 (大学生)
- 贵宾: 0.272
- 金币: 19357.1
- 帖子: 6580
- 在线: 2770.9小时
- 虫号: 856414
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
silicare(金币+3, EPI+1): 2011-06-25 09:06:23
nayitian_nan(金币+2): 恩啊，就是的，是看了淀粉酶你给那个朋友的帖子，我考虑过超滤，但实验室条件有限，我打算透析完直接冷冻干燥，以前是聚乙二醇浓缩后冻干的~ 2011-06-25 09:47:53
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
silicare(金币+3, EPI+1): 2011-06-25 09:06:23
nayitian_nan(金币+2): 恩啊，就是的，是看了淀粉酶你给那个朋友的帖子，我考虑过超滤，但实验室条件有限，我打算透析完直接冷冻干燥，以前是聚乙二醇浓缩后冻干的~ 2011-06-25 09:47:53
|
你说看到那样说的那个人就是我，很聪明，懂得先搜集资料。但是PEG2万确实是有可能透得过排阻3500的透析袋的，虽然标明3千五的透析袋质量再差，有超过2万的孔径也少，但透析袋的排阻标准是球状蛋白质，PEG是线性的，理论上比3千5小的孔径也能进去。 你用了硫酸铵沉淀，下一步如果接上疏水层析也可以浓缩样品，我样品有二百多毫升的层析之后活力组分合并大概有50毫升，算是浓缩了，也纯化了好几倍，不过会有30%损失。 你也可以超滤，用滤膜，可以买超滤管离心，也可以买超滤膜开氮气加压。 至于PEG2万对你的蛋白质有没有影响就很难说了，蛋白质各有不同，谁都说不定，要先自己试。 |
3楼2011-06-24 23:17:49
4楼2011-06-29 17:06:53
简单回复
xuwei370814楼
2013-07-05 17:04
回复
