24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 4121  |  回复: 13
本帖产生 2 个 BioEPI ,点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

nayitian_nan

木虫 (小有名气)


[交流] 聚乙二醇浓缩蛋白对蛋白的影响

一直在用20000的聚乙二醇浓缩我的蛋白,方法是这样的,我的蛋白通过硫酸铵沉淀后,袋里水很多,将聚乙二醇晶体洒在透析袋(排阻3500)上,直到析出水分达到要求为止。
       今天逛论坛,看到有人说聚乙二醇虽然分子量大,但这种浓缩方法也可能使一部分进入到透析袋中,想问问,聚乙二醇与蛋白质接触,会对蛋白质产生影响吗?我这种浓缩直接撒晶体的方法,对我的蛋白会有变性等影响吗?我的蛋白主要是碱性蛋白。谢了
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

» 抢金币啦!回帖就可以得到:

查看全部散金贴

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
silicare(金币+3, EPI+1): 2011-06-25 09:06:23
nayitian_nan(金币+2): 恩啊,就是的,是看了淀粉酶你给那个朋友的帖子,我考虑过超滤,但实验室条件有限,我打算透析完直接冷冻干燥,以前是聚乙二醇浓缩后冻干的~ 2011-06-25 09:47:53
你说看到那样说的那个人就是我,很聪明,懂得先搜集资料。但是PEG2万确实是有可能透得过排阻3500的透析袋的,虽然标明3千五的透析袋质量再差,有超过2万的孔径也少,但透析袋的排阻标准是球状蛋白质,PEG是线性的,理论上比3千5小的孔径也能进去。

你用了硫酸铵沉淀,下一步如果接上疏水层析也可以浓缩样品,我样品有二百多毫升的层析之后活力组分合并大概有50毫升,算是浓缩了,也纯化了好几倍,不过会有30%损失。

你也可以超滤,用滤膜,可以买超滤管离心,也可以买超滤膜开氮气加压。

至于PEG2万对你的蛋白质有没有影响就很难说了,蛋白质各有不同,谁都说不定,要先自己试。
3楼2011-06-24 23:17:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答

zsy1106

金虫 (小有名气)


★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
nayitian_nan(金币+1): 谢谢,还好,我用的是水溶液,里外都是~ 2011-06-24 17:02:35
amisking(金币+3): 鼓励应助 2011-06-24 20:08:56
silicare(EPI+1): 2011-06-25 09:06:16
一般来说这样做不会有影响。楼主担心的话,可以试试别的方法啊。例如:
1、蛋白浓缩管——快且保险的方法;
2、用电风扇对着透析袋吹,或者实验室如果有抽干室或者干燥室,放进去,过一段时间去看看,水分就会少掉很多,虽然方法有点土,但是能用(我用过),但是这样做要注意的是,要求一定要低温保存的蛋白谨慎操作,毕竟电风扇不能放进冰箱,抽干室即使有空调温度也不会很低。
还有就是注意水分去掉后,除了蛋白浓缩了外,缓冲液的离子浓度之类的也会改变,有需要的话记得要调回去。
2楼2011-06-24 15:40:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiem188

铜虫 (小有名气)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
nayitian_nan(金币+2): 操作步骤告诉我吧~ 2011-06-29 19:27:44
超滤不是很方便的啊
4楼2011-06-29 17:06:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yjlfirst

木虫 (著名写手)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
超滤也不是很准确的,误差太大
7楼2011-07-02 08:14:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
xuwei370814楼
2013-07-05 17:04   回复  
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿上海海洋大学083200食品学硕,求调剂,接受其他专业 +9 what张 2026-04-01 10/500 2026-04-06 22:15 by qlm5820
[考研] 生物学学硕求调剂:351分一志愿南京师范大学生物学专业 +6 …~、王…~ 2026-04-06 7/350 2026-04-06 18:54 by macy2011
[考研] 362求调剂一志愿中国石油大学 +4 我要考大 2026-04-06 6/300 2026-04-06 14:11 by 无际的草原
[考研] 324求调剂 +3 k可乐 2026-04-05 4/200 2026-04-06 09:54 by 蓝云思雨
[考研] 332求调剂 +17 小小孟... 2026-04-05 18/900 2026-04-06 09:51 by 蓝云思雨
[考研] 085602调剂 初试总分335 +9 19123253302 2026-04-05 9/450 2026-04-06 06:14 by houyaoxu
[考研] 283求调剂 +5 baiiyu 2026-04-05 6/300 2026-04-05 20:35 by 啵啵啵0119
[考研] 一志愿江南大学085501机械工程专硕326分,本科佳木斯大学 +5 顾若浮生 2026-04-03 9/450 2026-04-05 09:57 by 1753564080
[考博] 申博 +7 IQwQl 2026-04-04 7/350 2026-04-04 23:32 by mumin1990
[考研] 材料调剂 +11 一样YWY 2026-04-02 13/650 2026-04-04 23:10 by 无际的草原
[考研] 可跨专业调剂 +3 周的得地 2026-04-04 6/300 2026-04-04 22:21 by barlinike
[考研] 材料调剂 +12 一样YWY 2026-04-02 13/650 2026-04-04 20:49 by 蓝云思雨
[考研] 298求调剂 +5 zzz,,r 2026-04-02 8/400 2026-04-04 19:55 by 蓝云思雨
[考研] 一志愿武理材料工程302调剂环化或化工 +19 Doleres 2026-03-31 20/1000 2026-04-04 16:44 by 啊俊!
[考研] 265求调剂 +17 林深温澜 2026-04-01 20/1000 2026-04-04 01:09 by userper
[考研] 材料科学与工程考研 +10 拯救皮特托先生 2026-04-02 10/500 2026-04-03 23:57 by userper
[考研] 283分材料与化工求调剂 +29 罗KAKA 2026-04-02 29/1450 2026-04-03 23:56 by userper
[考研] 工科 267求调剂 +5 wanwan00 2026-04-02 7/350 2026-04-03 14:14 by zhangdingwa
[考研] 262求调剂 +6 励志一定发文章 2026-04-02 7/350 2026-04-03 09:54 by linyelide
[考研] 260求调剂 +3 朱芷琳 2026-04-02 3/150 2026-04-03 08:44 by yulian1987
信息提示
请填处理意见