24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 4140  |  回复: 13
本帖产生 2 个 BioEPI ,点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

nayitian_nan

木虫 (小有名气)


[交流] 聚乙二醇浓缩蛋白对蛋白的影响

一直在用20000的聚乙二醇浓缩我的蛋白,方法是这样的,我的蛋白通过硫酸铵沉淀后,袋里水很多,将聚乙二醇晶体洒在透析袋(排阻3500)上,直到析出水分达到要求为止。
       今天逛论坛,看到有人说聚乙二醇虽然分子量大,但这种浓缩方法也可能使一部分进入到透析袋中,想问问,聚乙二醇与蛋白质接触,会对蛋白质产生影响吗?我这种浓缩直接撒晶体的方法,对我的蛋白会有变性等影响吗?我的蛋白主要是碱性蛋白。谢了
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

» 抢金币啦!回帖就可以得到:

查看全部散金贴

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yjlfirst

木虫 (著名写手)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
超滤也不是很准确的,误差太大
7楼2011-07-02 08:14:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答

zsy1106

金虫 (小有名气)


★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
nayitian_nan(金币+1): 谢谢,还好,我用的是水溶液,里外都是~ 2011-06-24 17:02:35
amisking(金币+3): 鼓励应助 2011-06-24 20:08:56
silicare(EPI+1): 2011-06-25 09:06:16
一般来说这样做不会有影响。楼主担心的话,可以试试别的方法啊。例如:
1、蛋白浓缩管——快且保险的方法;
2、用电风扇对着透析袋吹,或者实验室如果有抽干室或者干燥室,放进去,过一段时间去看看,水分就会少掉很多,虽然方法有点土,但是能用(我用过),但是这样做要注意的是,要求一定要低温保存的蛋白谨慎操作,毕竟电风扇不能放进冰箱,抽干室即使有空调温度也不会很低。
还有就是注意水分去掉后,除了蛋白浓缩了外,缓冲液的离子浓度之类的也会改变,有需要的话记得要调回去。
2楼2011-06-24 15:40:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
silicare(金币+3, EPI+1): 2011-06-25 09:06:23
nayitian_nan(金币+2): 恩啊,就是的,是看了淀粉酶你给那个朋友的帖子,我考虑过超滤,但实验室条件有限,我打算透析完直接冷冻干燥,以前是聚乙二醇浓缩后冻干的~ 2011-06-25 09:47:53
你说看到那样说的那个人就是我,很聪明,懂得先搜集资料。但是PEG2万确实是有可能透得过排阻3500的透析袋的,虽然标明3千五的透析袋质量再差,有超过2万的孔径也少,但透析袋的排阻标准是球状蛋白质,PEG是线性的,理论上比3千5小的孔径也能进去。

你用了硫酸铵沉淀,下一步如果接上疏水层析也可以浓缩样品,我样品有二百多毫升的层析之后活力组分合并大概有50毫升,算是浓缩了,也纯化了好几倍,不过会有30%损失。

你也可以超滤,用滤膜,可以买超滤管离心,也可以买超滤膜开氮气加压。

至于PEG2万对你的蛋白质有没有影响就很难说了,蛋白质各有不同,谁都说不定,要先自己试。
3楼2011-06-24 23:17:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiem188

铜虫 (小有名气)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
nayitian_nan(金币+2): 操作步骤告诉我吧~ 2011-06-29 19:27:44
超滤不是很方便的啊
4楼2011-06-29 17:06:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
xuwei370814楼
2013-07-05 17:04   回复  
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 336求调剂,一志愿中科大 +6 墨彧 yuyu 2026-04-06 6/300 2026-04-06 23:19 by zzchen2000
[考研] 085600材料与化工专硕329 求调剂 +11 额cc 2026-04-06 11/550 2026-04-06 22:33 by chenzhimin
[考研] 生物学学硕求调剂:351分一志愿南京师范大学生物学专业 +6 …~、王…~ 2026-04-06 7/350 2026-04-06 18:54 by macy2011
[考研] 材料专硕283求调剂 +17 试试看呗 2026-04-04 18/900 2026-04-06 09:24 by 286640313
[考研] 372分,材料与化工,一志愿湖南大学,求调剂 +3 蓝笺片 2026-04-01 3/150 2026-04-06 09:04 by 无际的草原
[考研] 308求调剂 +4 maverick^_^ 2026-04-03 4/200 2026-04-05 19:08 by 蓝云思雨
[考研] 一志愿北京交通大学材料工程总分358求调剂 +4 cs0106 2026-04-04 4/200 2026-04-05 18:46 by imissbao
[考研] 材料0856 英一数二 323 求调剂 +14 袁sy 2026-04-01 14/700 2026-04-05 18:18 by cql1109
[考研] 298求调剂 +3 manman511 2026-04-05 3/150 2026-04-05 18:09 by kk112233
[考研] 359求调剂22408 +3 123456789qw 2026-03-31 3/150 2026-04-05 10:09 by zhq0425
[考研] +5 化工专硕323分 2026-04-04 5/250 2026-04-05 08:02 by 544594351
[考研] 323分(计算机视觉和大模型项目)能直接上手 +3 chaoxiicy 2026-04-01 3/150 2026-04-05 00:50 by chongya
[考研] 11408 一志愿西电,277分求调剂 +4 zhouzhen654 2026-04-03 4/200 2026-04-04 18:10 by 猪会飞
[考研] 调剂0855-288 +5 x熊二a 2026-04-03 5/250 2026-04-04 00:19 by 猪会飞
[基金申请] esi高被引论文是不是能对中标有所加分和帮助呢 +5 redcom 2026-04-01 6/300 2026-04-03 15:15 by Howard28
[考研] 338求调剂,一志愿能源动力,外语是日语203 +5 zzz,,r 2026-04-02 5/250 2026-04-03 09:45 by 蓝云思雨
[考研] 调剂 +7 祉岷. 2026-04-02 7/350 2026-04-03 09:11 by 花呗还欠600
[考研] 293求调剂 +4 珂珂乐 2026-04-02 4/200 2026-04-02 20:10 by 6781022
[考研] 08工科求调剂290分 +5 1314捧花 2026-04-02 8/400 2026-04-02 13:16 by 乔哒哒哒
[考研] 0805求调剂 +8 是水分 2026-03-31 8/400 2026-04-02 10:46 by guanxin1001
信息提示
请填处理意见