| 查看: 3896 | 回复: 13 | ||||
| 本帖产生 2 个 BioEPI ，点击这里进行查看 | ||||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||||
[交流]
聚乙二醇浓缩蛋白对蛋白的影响
|
||||
|
一直在用20000的聚乙二醇浓缩我的蛋白，方法是这样的，我的蛋白通过硫酸铵沉淀后，袋里水很多，将聚乙二醇晶体洒在透析袋（排阻3500）上，直到析出水分达到要求为止。 今天逛论坛，看到有人说聚乙二醇虽然分子量大，但这种浓缩方法也可能使一部分进入到透析袋中，想问问，聚乙二醇与蛋白质接触，会对蛋白质产生影响吗？我这种浓缩直接撒晶体的方法，对我的蛋白会有变性等影响吗？我的蛋白主要是碱性蛋白。谢了 |
回复此楼» 猜你喜欢
交叉科学部支持青年基金，对三无青椒是个机会吗？
已经有3人回复
-
国家级人才课题组招收2026年入学博士
已经有5人回复
-
Fe3O4@SiO2合成
已经有6人回复
-
青年基金C终止
已经有4人回复
-
青椒八年已不青，大家都被折磨成啥样了？
已经有7人回复
-
为什么nbs上溴 没有产物点出现呢
已经有10人回复
-
救命帖
已经有11人回复
-
招博士
已经有5人回复
-
26申博求博导推荐-遥感图像处理方向
已经有4人回复
-
限项规定
已经有7人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 如何除去蛋白质中的聚乙二醇？？？
已经有7人回复
- 【求助/交流】蛋白溶液浓缩
已经有32人回复
- 【求助】蛋白质用聚乙二醇浓缩后有沉淀，是怎么回事啊？
已经有5人回复
- 【求助/交流】如何分开聚乙二醇和蛋白质
已经有6人回复
- 聚乙二醇浓缩蛋白
已经有6人回复
» 抢金币啦！回帖就可以得到:
-
诚征女友，非诚勿扰
+3/197
-
招聘启事 江南大学乳品加工与营养健康团队博士后招聘
+2/110
-
西北工业大学民航学院复合材料领域招聘两名博后
+1/89
-
“超分子材料交叉研究团队”联合诚聘博士后 [清华/吉大/复旦/北大]
+1/80
-
“超分子材料交叉研究团队”联合诚聘博士后 [清华/吉大/复旦/北大]
+1/79
-
深圳大学信息功能聚合物电介质方向“申请-考核制”博士生招生
+1/75
-
北京理工大学 珠海校区全职院士招数名博士生--申请考核制-半导体、光学、微电子
+2/66
-
南开大学物理学院张书辉副教授招收凝聚态物理理论方向博士生、硕士生
+1/30
-
华中科技大学周英教授招博后
+1/27
-
青岛大学化学院泰山学者冯佳课题组申请考核制博士招生
+1/14
-
博士后, 博士招生 美国大纽约地区 NJIT
+1/11
-
顺磁计算交流
+1/6
-
中山大学柔性电子学院黄维院士团队诚招柔性可穿戴电子方向博士生（2026年9月入学）
+1/4
-
深圳大学院士团队2026“申请-考核制”博士研究生招生
+1/3
-
福建师范大学柔性电子学院 院士团队招2026级博士 光电器件、发光传感忆阻器
+1/3
-
标准求助 SN/T 5263-2020悬赏10个金币
+1/2
-
中国科学技术大学 招特任副研究员 有机-钙钛矿方向
+1/2
-
哈工深教授招收电路设计/建模/加工制备专业博士、博士后
+1/2
-
南开大学齐迹课题组诚聘分子生物学、免疫学、有机分子合成相关方向的博士后和研究生
+1/1
-
中山大学农业与生物技术学院周潇峰课题组诚聘微生物/植物病理学方向科研助理
+1/1
8楼2011-08-30 15:58:36
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
nayitian_nan(金币+1): 谢谢，还好，我用的是水溶液，里外都是~ 2011-06-24 17:02:35
amisking(金币+3): 鼓励应助 2011-06-24 20:08:56
silicare(EPI+1): 2011-06-25 09:06:16
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
nayitian_nan(金币+1): 谢谢，还好，我用的是水溶液，里外都是~ 2011-06-24 17:02:35
amisking(金币+3): 鼓励应助 2011-06-24 20:08:56
silicare(EPI+1): 2011-06-25 09:06:16
|
一般来说这样做不会有影响。楼主担心的话，可以试试别的方法啊。例如： 1、蛋白浓缩管——快且保险的方法； 2、用电风扇对着透析袋吹，或者实验室如果有抽干室或者干燥室，放进去，过一段时间去看看，水分就会少掉很多，虽然方法有点土，但是能用（我用过），但是这样做要注意的是，要求一定要低温保存的蛋白谨慎操作，毕竟电风扇不能放进冰箱，抽干室即使有空调温度也不会很低。 还有就是注意水分去掉后，除了蛋白浓缩了外，缓冲液的离子浓度之类的也会改变，有需要的话记得要调回去。 |
2楼2011-06-24 15:40:04
冼亮淀粉酶
专家顾问 (知名作家)
-
专家经验: +248 - BioEPI: 73
- 应助: 257 (大学生)
- 贵宾: 0.272
- 金币: 19356.1
- 帖子: 6580
- 在线: 2770.9小时
- 虫号: 856414
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
silicare(金币+3, EPI+1): 2011-06-25 09:06:23
nayitian_nan(金币+2): 恩啊，就是的，是看了淀粉酶你给那个朋友的帖子，我考虑过超滤，但实验室条件有限，我打算透析完直接冷冻干燥，以前是聚乙二醇浓缩后冻干的~ 2011-06-25 09:47:53
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
silicare(金币+3, EPI+1): 2011-06-25 09:06:23
nayitian_nan(金币+2): 恩啊，就是的，是看了淀粉酶你给那个朋友的帖子，我考虑过超滤，但实验室条件有限，我打算透析完直接冷冻干燥，以前是聚乙二醇浓缩后冻干的~ 2011-06-25 09:47:53
|
你说看到那样说的那个人就是我，很聪明，懂得先搜集资料。但是PEG2万确实是有可能透得过排阻3500的透析袋的，虽然标明3千五的透析袋质量再差，有超过2万的孔径也少，但透析袋的排阻标准是球状蛋白质，PEG是线性的，理论上比3千5小的孔径也能进去。 你用了硫酸铵沉淀，下一步如果接上疏水层析也可以浓缩样品，我样品有二百多毫升的层析之后活力组分合并大概有50毫升，算是浓缩了，也纯化了好几倍，不过会有30%损失。 你也可以超滤，用滤膜，可以买超滤管离心，也可以买超滤膜开氮气加压。 至于PEG2万对你的蛋白质有没有影响就很难说了，蛋白质各有不同，谁都说不定，要先自己试。 |
3楼2011-06-24 23:17:49
4楼2011-06-29 17:06:53
简单回复
xuwei370814楼
2013-07-05 17:04
回复
