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纯化后的蛋白做western,出现很明显的两条带,请问是二聚体吗?怎么打开成单体?
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铜虫
(初入文坛)
应助: 0
(幼儿园)
金币: 174.3
帖子: 12
在线: 11.4小时
虫号: 3405511
注册: 2014-09-09
性别: GG
专业: 生物大分子结构与功能
我的也是蛋白也是,活性蛋白为可溶性二聚体,大肠杆菌表达系统,表达出来的是单体,但是上NI柱纯化之后就会出现二聚体,这样的二聚体我尝试过去掉变性剂,之后可溶但是容易降解,同问,这样的二聚体可能具有活性吗??
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11楼
2015-07-14 00:08:10
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DL_nvwu
铜虫
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应助: 0
(幼儿园)
金币: 20.9
红花: 3
帖子: 183
在线: 58.4小时
虫号: 2498331
注册: 2013-06-06
性别:
MM
专业: 细胞周期与调控
引用回帖:
8楼
:
Originally posted by
pdspjl126
at 2011-07-11 11:37:04
我查了一下 我的蛋白分子量是22.5KDa ,有四个半胱氨酸 文献说它的活性状态是可溶性的二聚体。我的蛋白是以包涵体的形式存在的,我用6M尿素溶解包涵体后又进行梯度透析使其复性,然后才上柱纯化的,纯化结果有单体 ...
楼主,为什么复性后要再纯化呢
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欢迎学术交流,共同进步
12楼
2017-04-09 11:00:39
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