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ml4528000

新虫 (初入文坛)

[求助] DNA的酚氯仿抽提后乙醇沉淀不出来

小弟今天对前段时间得到的cDNA进行酚氯仿抽提除去杂质进行下一步实验,具体步骤是先加等体积酚:氯仿:异戊醇混合物收集水相,然后加等体积氯仿:异戊醇再收集水相,接着加2倍体积的正丁醇脱水,取水相加入2倍体积的无水乙醇和总体积1/10的4M醋酸铵,这步骤没有看到DNA沉淀下来。前面的抽提和脱水以前做过,能确定DNA在水相中,不知道沉淀的步骤有什么问题,或者要注意什么,还请大伙不吝赐教啊!!!
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bioleo

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

大家说的都差不多了,我就提醒点,醋酸纳或醋酸铵的pH是5.2,乙醇或异戊醇纯度够的话直接放-20度沉淀,不会结冰
11楼2012-08-22 14:24:50
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